古朵实验：TRIzol RNA提取方法
（一）试剂准备
1．trizol试剂。
2．氯-仿
3．异-丙醇
4．75%乙醇（depc h2o配制）
5．depc h2o
（二）操作步骤
1． 样品处理：
（1）培养细胞：收获细胞1-5×107，移入1.5ml离心管中，加入1ml trizol，混匀，室温静置5min。
（2）组织：取50-100mg组织（新鲜或-70℃及液氮中保存的组织均可）置1.5ml离心管中，加入1ml trizol充分匀浆，室温静置５min。
2．加入0.2ml氯-仿，振荡15s，静置2min。
3．4℃离心，12000g×15min，取上清。
4．加入0.5ml异丙醇，将管中液体轻轻混匀，室温静置10min。
5．4℃离心，12000g×10min，弃上清。
6．加入1ml 75%乙醇，轻轻洗涤沉淀。4℃，7500g×5min，弃上清。
7. 晾干，加入适量的depc h2o溶解（65℃促溶10-15min）。
（三）注意事项
1．样品量和trizol的加入量一定要按步骤（1）的比例，不能随意增加样品量或减少trizol量，否则会使内源性rnase的抑制不*，导致rna降解。
2．实验过程必须严格防止rnsae的污染。
总rna定量
rna定量方法与dna定量相似。rna在260nm波长处有蕞大的吸收峰。因此，可以用260nm波长分光测定rna浓度，od值为1相当于大约40μg/ml的单链rna。如用1cm光径，用 ddh2o稀释dna样品n倍并以ddh2o为空白对照，根据此时读出的od260值即可计算出样品稀释前的浓度：
rna（mg/ml）=40×od260读数×稀释倍数(n)/1000
rna纯品的od260/od280的比值为2.0，故根据od260/od280的比值可以估计rna的纯度。若比值较低，说明有残余蛋白质存在；比值太高，则提示rna有降解。
ZS-1型全自动栓剂灌封机组的相关知识普及
看完这些你就知道该如何维护保养定氮仪了
石蜡切片机要怎么进行保养和存放
离心机振动传感器PC42
防尘绿色盖土网效果如何
古朵实验：TRIzol RNA提取方法
除尘器管道隔爆阀规格如何选择
影响脉冲电解去毛刺加工效果的因素
江苏振迪检测的振动分析诊断技术应用于冶金行业！
数显摆锤冲击试验仪的操作要素
如何了解美国ROSS电磁阀的使用方法
便捷式滤料测试仪
常见的土壤监测设备都有哪些？
莲子杀虫杀虫卵机为什么用微波呢
何为接触角及如何测量
FESTO圆形气缸怎么选型的各种功能大全
二次锂离子电池电解液 - 水分、游离酸的测定
国内制药设备行业发展真进入下半场了？
抗折试验机的使用注意事项
接地电阻测试仪怎么使用电位下降法
1．trizol试剂。
2．氯-仿
3．异-丙醇
4．75%乙醇（depc h2o配制）
5．depc h2o
（二）操作步骤
1． 样品处理：
（1）培养细胞：收获细胞1-5×107，移入1.5ml离心管中，加入1ml trizol，混匀，室温静置5min。
（2）组织：取50-100mg组织（新鲜或-70℃及液氮中保存的组织均可）置1.5ml离心管中，加入1ml trizol充分匀浆，室温静置５min。
2．加入0.2ml氯-仿，振荡15s，静置2min。
3．4℃离心，12000g×15min，取上清。
4．加入0.5ml异丙醇，将管中液体轻轻混匀，室温静置10min。
5．4℃离心，12000g×10min，弃上清。
6．加入1ml 75%乙醇，轻轻洗涤沉淀。4℃，7500g×5min，弃上清。
7. 晾干，加入适量的depc h2o溶解（65℃促溶10-15min）。
（三）注意事项
1．样品量和trizol的加入量一定要按步骤（1）的比例，不能随意增加样品量或减少trizol量，否则会使内源性rnase的抑制不*，导致rna降解。
2．实验过程必须严格防止rnsae的污染。
总rna定量
rna定量方法与dna定量相似。rna在260nm波长处有蕞大的吸收峰。因此，可以用260nm波长分光测定rna浓度，od值为1相当于大约40μg/ml的单链rna。如用1cm光径，用 ddh2o稀释dna样品n倍并以ddh2o为空白对照，根据此时读出的od260值即可计算出样品稀释前的浓度：
rna（mg/ml）=40×od260读数×稀释倍数(n)/1000
rna纯品的od260/od280的比值为2.0，故根据od260/od280的比值可以估计rna的纯度。若比值较低，说明有残余蛋白质存在；比值太高，则提示rna有降解。
ZS-1型全自动栓剂灌封机组的相关知识普及
看完这些你就知道该如何维护保养定氮仪了
石蜡切片机要怎么进行保养和存放
离心机振动传感器PC42
防尘绿色盖土网效果如何
古朵实验：TRIzol RNA提取方法
除尘器管道隔爆阀规格如何选择
影响脉冲电解去毛刺加工效果的因素
江苏振迪检测的振动分析诊断技术应用于冶金行业！
数显摆锤冲击试验仪的操作要素
如何了解美国ROSS电磁阀的使用方法
便捷式滤料测试仪
常见的土壤监测设备都有哪些？
莲子杀虫杀虫卵机为什么用微波呢
何为接触角及如何测量
FESTO圆形气缸怎么选型的各种功能大全
二次锂离子电池电解液 - 水分、游离酸的测定
国内制药设备行业发展真进入下半场了？
抗折试验机的使用注意事项
接地电阻测试仪怎么使用电位下降法