液相色谱法检测孕酮体外释药量
孕酮释放出来的天然孕酮经过阴道黏膜直接吸收作用于人体,没有首过效应,在乳汁里只有微量分布,不影响婴儿身体发育,故适用于哺乳期。且孕酮还可治疗黄体不足、子宫内膜面有很好的应用前景。
应用气相色谱法来检测孕酮的体外释药量的研究虽已见报道，但在分析领域,气相色谱仪的普及率远没有液相色谱仪和紫外分光光度计的普及率高。
hplc法：量取1000ml超纯水于1000ml溶出杯中,将含2g孕酮的孕酮和空白硅橡胶分别用细尼龙绳固定在溶出仪的搅拌桨上,水浴温度37.0±0.5℃,以50r/min的转速旋转,每24h更换介质溶液。d7分别取10µl空白及孕酮的体外释放液注入液相色谱仪,在相同测试条件下,记录色谱图。
系统适用性试验:用十八烷基键合硅胶为填充剂,以甲醇:水(63:37)为流动相,流速为1.0ml/min,检测波长254nm，理论塔板数按孕酮峰计算应不低于1000。
孕酮对照品溶液制备:精密称定孕酮对照品10mg,置10ml量瓶中,用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀。精密量取该对照品溶液1ml，置100ml量瓶中，用超纯水稀释至刻度，摇匀待用。
分别精密量取孕酮对照品溶液和孕酮体外释放液各10µl，注入液相色谱仪，按外标法以峰面积计算体外释放液中孕酮的含量。
关键词：气相色谱仪 液相色谱仪 紫外分光光度计 溶出仪 色谱仪
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