1、包被原的性质:
①亲和素*:先亲和素先包被载体,参加*化的dna,这种包被办法均匀、结实,已扩展应用于各种抗原物质的定量测定。
②脂类物质:可将其在有机溶剂(例如乙醇)中溶解后参加elisa板孔中,开盖置冰箱过夜或冷风吹干,待酒精蒸发后,让脂质自然干固在固相表面。
③小分子:有必要依托和大的蛋白载体偶联后才能固定在固相载体上。
2、elisa试剂盒包被液的挑选:
一般挑选ph9.6的碳酸盐缓冲液。但有时由于试验的需求,包被原的特殊性也可能选用中性的缓冲溶液来包。
应留心以下原理:由于蛋白质与聚苯乙烯固相载体是通过物理吸附结合的,靠的是蛋白质分子结构上的疏水基团与固相载体表面的疏水基团间的效果,这种物理吸附对错特异性的,受蛋白质的分子量、等电点、浓度等的影响,大分子蛋白质较小分子蛋白质一般含有更多的疏水基团,故更易吸附到固相载体表面。
3、关闭:
继包被之后用高浓度的无关蛋白质溶液再包被的进程。关闭便是让许多不相关的蛋白质充填这些空位,从而排斥elisa后的进程中搅扰物质的再吸附。
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