紫外可见分光光度计测定食品中亚硝酸盐
摘要：亚硝酸盐广泛存在于自然界，在果酱中也有一定的含量。现已证明，亚硝酸盐与食品中固有的胺类化合物是产生致癌物质-亚硝胺的前体物质。
在果酱测定亚硝酸盐的过程中，用沉淀剂将样品处理后进行过滤，在滤液中加入磺胺和n-1-萘基-乙二胺，使其显粉红色，然后用分光光度计在其*大吸收波长下测定其吸光度。将测得的吸光度与*标准系列比较定量。
亚硝酸根与芳胺或苯甲胺反应生成致癌物亚硝胺已经引起国内外的普遍关注。随着分析化学新方法和新技术的不断出现和发展，食品中亚硝酸盐的检测方法也更加多样化，新的检测方法层出不穷。亚硝酸盐是潜在的致癌物质，而乳与乳制品中亚硝酸盐含量过高会引起高铁蛋白症，因而要严格控制其含量。
1 主要试剂和仪器
1.1仪器：uv-6100s型紫外可见分光光度计
1.2试剂：
标准亚硝酸盐溶液：gbw（e）0802230504水中亚硝酸盐-氮，浓度：100mg/ml，并逐级稀释为0.9857μg/ml的标准贮备液；
硫酸锌溶液：535g/l；亚铁***溶液：172g/l；
盐酸-氨水缓冲溶液：ph9.6~9.7；
显色液1：盐酸：水= 450：550（v：v）盐酸溶液；
显色液2：5g/l磺胺溶液；
显色液3：1g/l萘胺盐酸盐溶液。
试验中所用试剂均为分析纯，所用水为去离子水。
2 试验方法
2.1工作曲线
标准曲线的绘制：取 6个50ml容量瓶，分别加入浓度为0.9857μg/ml的*标准贮备液0.1，0.5，1.0，2.0，5.0，10.0ml，加水至20ml，并做空白试验，然后依次加入3ml显色液1，2.5ml显色液2，混合均匀后，静置5min，加1ml显色液3， 静置5min，用去离子水定容至刻度，此溶液浓度分别为0.00、1.96、 9.86、19.72、59.14、98.56、197.14μg/l。静置5min后于540nm处，用１cm比色皿进行测定，并以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标绘制标准曲线（见图1）。工作曲线方程为a=0.0011c 0.0026，相关系数r2=0.9995。
2.2样品测定
2.2.1 样品前处理
将样品用粉碎机粉碎后，称25~30g样品，按顺序加入25ml硫酸锌溶液，25ml亚铁***溶液，40ml盐酸-氨水缓冲溶液，每加一种试剂充分混合，用去离子水定容于250ml容量瓶中，静置40min，用定性中速滤纸过滤后收集滤液。
2.2.2样品测定
移取20ml滤液于50ml容量瓶中，加3ml显色液1，2.5ml 显色液2，摇匀，静置5min；加1ml显色液3，静置5min，定容后静置5min，上机。同时移取20ml滤液于50ml容量瓶中做为参比溶液，加水定容至刻度，摇匀后静置，与样品同测.
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硫酸锌溶液：535g/l；亚铁***溶液：172g/l；
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