简介:抗抑郁药是一类重要的治疗精神疾病的药 物,它们的特点是可被吸收、分布、代谢 和排泄(adme),且被用于进行药物的 滥用、毒理和有效性监测。三环和四环类 的抗抑郁药已经被美国食品与药品管理局 (fda)批准用于治疗抑郁症及脑疾病以外的抑郁症,包括焦虑症、注意力缺陷多动症、神经痛和失眠症。环状抗抑郁药 是通过在大脑中影响分子信号通路的方式来控制抑郁症的症状,药物的作用机 理包括调节反应的特定化学物质(神经递质)。抗抑郁药物的作用是通过对抗 作用以阻止神经递质再次吸收它们的目标受体,从而增强血清素和/或肾上腺素 能的神经递质。通过结合各自的神经递质分子,特异性的抑制人体5-羟色胺受 体3a(5-ht3a),以获得特定的疗效。
本应用文献采用超高压液相色谱仪与大气压化学电离质谱仪(apci-lc/ms)联 用技术,结合简单和高重现性的样品制备方法,建立了一种快速、简单和高效 的定量分析人血浆中抗抑郁药的方法。该操作方法 在临床研究和药代动力学研 究中具有提高样品分析通量的潜力。
试验 样品 在5等分的人血浆样品(0.5ml,invitrogencorp.,carlsbad, ca)中加入4种经过逐级稀释的抗抑郁药(丙嗪、sigma-aldrich corp; st. louis, mo),使血浆中最终药物浓度分别为1,5,10,50和 100ng/ml。首先向血浆中加入1ml乙腈沉淀蛋白质, 然后将样品溶液涡旋5min,4500rpm离心10min,取 上清液并用0.45µm尼龙膜过滤((nalgene, rochester, ny)。样品由 lc/apci-ms采用全扫描(scan)和选择 离子监测(sim)两种模式进行分析。
结果 化合物鉴定 通过全扫描模式采集混合标准溶液的数据用来确定化合 物的保留时间及主要的定性、定量离子。由采集的色谱 图可知,4种被分析物均可得到基线分离,且确定了质 子化的分子离子[m+h] +,扣除背景的谱图见图1所示。
结果 化合物鉴定 通过全扫描模式采集混合标准溶液的数据用来确定化合物的保留时 间及主要的定性、定量离子。由采集的色谱图可知,4种被分析物均 可得到基线分离,且确定了质子化的分子离子[m+h] +,扣除背景的 谱图见图1所示
全扫描用于优化lc和ms定量采集数据的 参数,选择离子监测模式(sim)用于提高 分析方法的灵敏度。 校准和定量 利用perkinelmer chromera™色谱数据系 统对浓度为1 ng/ml至100 ng/ml的混合标 准溶液进行分析,建立标准曲线。每个浓度 水平进样分析三次,所得标准曲线线性关 系良好,其线性相关系数r 2 > 0.998。检测 限为0.5ng/ml(5:1 s/n rms),典型标准溶 液色谱图见图2所示。 人血浆样品中抗抑郁药的加标浓度与标准 溶液浓度一致。按照上述样品制备方法制 备样品后,使用lc/ms的sim模式对样品进 行分析。人血浆空白样品和加标样品的色 谱图分别见图3和4。 被分析物的平均回收率结果表明(通过5 个浓度计算),创建的分析方法能满足生 物体液中治疗药物定量检测需求的灵敏度 (表1)。
结论 环状抗抑郁药是治疗神经系统疾病的一个重要选择,尤其是抑郁 症。治疗监测需要建立一种快速、简单、具有选择性、灵敏度高和 准确的定性定量分析方法。 本研究中,我们建立了大气压化学电离(apci)与单四级杆质谱仪 联用的lc/ms分析方法,该方法能够解决人血浆中抗抑郁药物监 测分析时所需要的操作简单及耐用问题。该方法线性关系良好, 人血浆样品加标回收率结果优异,所有被分析物的低检测限 (lod)能达到0.5 ng/ml,这些结果表明我们能够满足人血浆中 药代动力学剂量分析的检测限需求。 简单的样品制备结合快速、灵敏的lc/ms方法可用于血浆中各种 其它治疗药物的监测分析
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