ColProof植物DNA快速提取试剂盒Col-D02产品应用介绍
试剂盒应用
本试剂盒采用裂解液配方在10 分钟内完成植物叶片、种子等的裂解、提取和纯化。提取对象包
括水稻、玉米、小麦等作物，也包括多糖多酚类植物（例如棉花、马铃薯、铁皮石斛等）。整个提
取过无需使用蛋白酶k 等酶类制剂。提取dna 可用于pcr、qpcr、sorthern blot、分子克隆、文
库构建等。
本试剂盒仅供研究使用，不可用于临床、食品、化妆品等领域。
试剂盒组成
保存条件
室温保存一年。
自备材料
无水乙醇、无dnase 和无rnase 离心管、β-巯基乙醇（选用）、rnasea（10mg/ml，或货号qr0101）
使用方法
1. 液氮研磨新鲜植物样本（如叶片、种子、花蕊约20-100mg），加入700μl 裂解液dp，充分混匀，
室温静置1 分钟。
备注：多糖多酚类样本，每700μl 裂解液dp 中加入14μlβ-巯基乙醇，从而提高rna 得率。
2. （选做）加入5μl rnase a（10mg/ml），室温静置5-10 分钟。
3. 加入0.5 倍体积无水乙醇，上下颠倒混匀，12,000rpm 离心1 分钟。
4. 取700μl 上清加入dna 吸附柱中，12,000rpm 离心30 秒，倒掉收集管中废液。
5. 向dna 吸附柱中加入500μl 洗涤液dwa，12,000rpm 离心1 分钟，倒掉收集管中废液。
6. 向dna 吸附柱中加入500μl 洗涤液dwb，12,000rpm 离心30 秒，倒掉收集管中废液。
7. 重复步骤6 一次。
8. 12,000rpm 离心2 分钟，倒掉收集管中废液。
9 将dna 吸附柱放入新无dnase 和无rnase 离心管中，加入30-50μl 洗脱液p，室温放置1 分钟。
10. 12,000rpm 离心2 分钟，得到dna 溶液，-80℃保存。
注意事项
1. 经常更换手套，防止dna 污染。
2. 使用无dnase 无rnase 的吸头和离心管，防止dna 降解。
3. 常更换吸头，防止交叉污染。
4. 动作轻柔，防止基因组dna 断裂。
5. 为了提高洗脱效率，可提前将洗脱液p 置于65℃水浴后再使用。
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使用方法
1. 液氮研磨新鲜植物样本（如叶片、种子、花蕊约20-100mg），加入700μl 裂解液dp，充分混匀，
室温静置1 分钟。
备注：多糖多酚类样本，每700μl 裂解液dp 中加入14μlβ-巯基乙醇，从而提高rna 得率。
2. （选做）加入5μl rnase a（10mg/ml），室温静置5-10 分钟。
3. 加入0.5 倍体积无水乙醇，上下颠倒混匀，12,000rpm 离心1 分钟。
4. 取700μl 上清加入dna 吸附柱中，12,000rpm 离心30 秒，倒掉收集管中废液。
5. 向dna 吸附柱中加入500μl 洗涤液dwa，12,000rpm 离心1 分钟，倒掉收集管中废液。
6. 向dna 吸附柱中加入500μl 洗涤液dwb，12,000rpm 离心30 秒，倒掉收集管中废液。
7. 重复步骤6 一次。
8. 12,000rpm 离心2 分钟，倒掉收集管中废液。
9 将dna 吸附柱放入新无dnase 和无rnase 离心管中，加入30-50μl 洗脱液p，室温放置1 分钟。
10. 12,000rpm 离心2 分钟，得到dna 溶液，-80℃保存。
注意事项
1. 经常更换手套，防止dna 污染。
2. 使用无dnase 无rnase 的吸头和离心管，防止dna 降解。
3. 常更换吸头，防止交叉污染。
4. 动作轻柔，防止基因组dna 断裂。
5. 为了提高洗脱效率，可提前将洗脱液p 置于65℃水浴后再使用。
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