应用数据分享 | 解析Lonza 96孔电转模块两大应用案例
2023年lonza neclefector™技术面世22周年，成功应用于原代细胞、干细胞、神经元等难以转染的细胞中，文献引用量超过23,000+篇，成为基因治疗、细胞治疗、免疫治疗研究中的一大助力。
随着技术和产业的进一步发展，高通量核转染的需求越来越高。lonza推出的4d-nucleofector™ 96孔模块，每块板最多可运行96个独立程序，非常适合于中高通量的电转实验，具有快速、通量高、编辑效率优秀等特点，可广泛应用于阵列cdna、工业生产元件、rnai以及crispr文库筛选中，是优化电转条件、药物靶点发现以及疫病研究的高效工具。
应用案例分享
#1
文献名称：a platform for context-specific genetic engineering of recombinant protein production by cho cells
应用方向：提高工业生产效率
发表期刊：journal of biotechnology
发表时间：2020
研究内容：在蛋白质生产中，为了提高细胞系生产效率，往往需要针对目的蛋白（target protein）寻找到最合适的表达载体和培养条件。因此筛选表达载体过程中需要高通量方法（ht）高效的表达不同载体并测试其细胞性能（蛋白质生产效率及细胞生长能力），作者利用lonza 96-well shuttle™产品，在蛋白生产细胞系cho中实现表达载体的高效筛选。
作者报道的实际测试数据：
a. lonza 96-well shuttle™产品转染效率（transfection efficiency）平均高达90%，且针对不同遗传载体转染效率差异较小
c. lonza 96-well shuttle™产品在随着加大电转质粒dna量(mass of mab expressing plasmid dna)加大对细胞活力(growth rate)影响较小
d. lonza 96-well shuttle™产品在不同批次(replicates)电转中，批间差异小(coefficient of variation)
#2
文献名称：validation of efficient high-throughput plasmid and sirna transfection of human monocyte-derived dendritic cells without cell maturation
应用方向：针对免疫细胞进行dna高效转染及rnai筛选
发表期刊：j immunol methods
发表时间：2010
研究内容：针对原代免疫细胞转染，传统电转往往效率低下并且会导致原代免疫细胞活化及成熟，为后续原代免疫细胞研究以及工业生产造成影响。本文中，作者利用lonza 96-well shuttle™产品，构建针对原代树突状细胞（primary dendritic cells）高效转染的平台，针对难以转染原代树突状细胞实现70%细胞活率及超50%的转染效率。并利用该高效转染平台在原代树突状细胞中敲低rig-i实现干扰素beta的下调表达。
作者报道的实际测试数据：
作者使用lonza特异性转染缓冲液在单核树突状细胞（modcs）测试不同程序下（nucleoporation program，x轴）转染gfp的效率。可见利用lonza 96-well shuttle™高通量系统筛选出ff137/ff168具有接近60%的转染效率，并且保持90%以上的未成熟单核树突状细胞状态。
作者随后测试了ff168程序在单核树突状细胞中sirna转染效率，rig-i蛋白表达量在核转染后显著下调。
在全新升级的lonza 4d-nucleofector™ 96孔电转模块中，可直接与4d-nucleofector™ 核心模块连接使用，用于96孔格式的中通量核转染。每块板最多可运行96个独立程序，非常适合于优化核转染条件或作为中高通量筛选的有效工具。
应用
只需一块板即可优化任何难以转染的细胞
测试建立实验的多个条件
筛选cdna, rnai或crispr、tcr文库
适用于细菌转化
优点
高效助力优化、筛选
每块板最多可运行96个独立程序，在5分钟内自动处理
可拓展性
模块化6×16 nucleocuvette™板实现可拓展的通量
电转条件可转化性
可在不同4d-nucleofector™模块中，使用相同优化好的电转条件，实现不同细胞量/通量的实验需求
自动化兼容
无缝集成到自动化液体处理环境中
优化方案
4d-nucleofector™ 96孔模块可使用现有的96-well 电转实验方案或参考x-unit 20ul体系电转实验方案和导电聚合物96孔nucleocuvette™板。
lonza knowledge center中的cell & transfection database中提供了特定细胞类型的优化方案或建议。在这些优化方案中，指出了经过内部测试的核转染条件。此外，还会分享我们在处理特定细胞类型方面的经验和知识，有效助力您的实验。
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#1
文献名称：a platform for context-specific genetic engineering of recombinant protein production by cho cells
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发表时间：2020
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作者报道的实际测试数据：
a. lonza 96-well shuttle™产品转染效率（transfection efficiency）平均高达90%，且针对不同遗传载体转染效率差异较小
c. lonza 96-well shuttle™产品在随着加大电转质粒dna量(mass of mab expressing plasmid dna)加大对细胞活力(growth rate)影响较小
d. lonza 96-well shuttle™产品在不同批次(replicates)电转中，批间差异小(coefficient of variation)
#2
文献名称：validation of efficient high-throughput plasmid and sirna transfection of human monocyte-derived dendritic cells without cell maturation
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发表时间：2010
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作者报道的实际测试数据：
作者使用lonza特异性转染缓冲液在单核树突状细胞（modcs）测试不同程序下（nucleoporation program，x轴）转染gfp的效率。可见利用lonza 96-well shuttle™高通量系统筛选出ff137/ff168具有接近60%的转染效率，并且保持90%以上的未成熟单核树突状细胞状态。
作者随后测试了ff168程序在单核树突状细胞中sirna转染效率，rig-i蛋白表达量在核转染后显著下调。
在全新升级的lonza 4d-nucleofector™ 96孔电转模块中，可直接与4d-nucleofector™ 核心模块连接使用，用于96孔格式的中通量核转染。每块板最多可运行96个独立程序，非常适合于优化核转染条件或作为中高通量筛选的有效工具。
应用
只需一块板即可优化任何难以转染的细胞
测试建立实验的多个条件
筛选cdna, rnai或crispr、tcr文库
适用于细菌转化
优点
高效助力优化、筛选
每块板最多可运行96个独立程序，在5分钟内自动处理
可拓展性
模块化6×16 nucleocuvette™板实现可拓展的通量
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可在不同4d-nucleofector™模块中，使用相同优化好的电转条件，实现不同细胞量/通量的实验需求
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4d-nucleofector™ 96孔模块可使用现有的96-well 电转实验方案或参考x-unit 20ul体系电转实验方案和导电聚合物96孔nucleocuvette™板。
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