裸鼠白细胞介素-6(il-6)elisa试剂盒操作步骤:
①.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
②.设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μl;
③.样本孔先加待测样本10μl,再加*40μl;空白孔不加。
④.除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(hrp)标记的检测抗体100μl,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
⑤.弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次 (也可用洗板机洗板)。
⑥.每孔加入底物a、b各50μl,37℃避光孵育15min。
⑦.每孔加入终止液50μl,15min内,在450nm波长处测定各孔的od值。
结果判断
绘制标准曲线:在excel工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应od值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。
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