PC-9人肺癌细胞传代、复苏操作
pc-9人肺癌细胞
human lung cancer cells,pc9
货号：yj-h263（str鉴定）
价格：1800.0
规格：1x106
细胞介绍
来源于人类腺癌的肺组织，至今仍有分化。
细胞特性
1）来源：人，肺腺癌组织
2）形态：上皮样，多数贴壁少量悬浮，
3）含量：>1x106细胞数
4）规格：t25瓶或者1ml冻存管包装
5）用途：仅供科研使用。
一．细胞处理：
1）冻存细胞的复苏：
将含有1ml细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入到含4-6ml完全培养基的离心管中混合均匀。在1000rpm条件下离心3-5min，弃去上清液，完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶（或皿）中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达70%-90%，即可进行传代培养。
该细胞轻微贴壁和悬浮培养的细胞，传代可以参考以下方法：
1. 收集：将培养瓶中的悬浮的细胞收集到离心管中。用不含钙、镁离子的pbs润洗细胞1-2次。由于细胞贴壁不牢pbs润洗后细胞会脱落所以pbs也要回收到离心管中。
2. 加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mm edta于培养瓶中（t25瓶1-2ml，t75瓶2-3ml）置于37℃培养箱中消化1-2分钟（难消化的细胞可以适当延长消化时间），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%fbs的培养基来终止消化。
3. 将收集到的悬浮细胞、pbs清洗液中的细胞和消化下来的贴壁细胞以1000rpml离心5min，弃去上清，补加1-2ml培养液后重悬混匀后将细胞悬液按1：2的比例分到新t25瓶中，添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力，后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
3）细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。
下面t25瓶为例；
1.细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中，可使用血球计数板计数，来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×106~1×107个活细胞/ml.
2.1000rpm离心3-5min，去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞 ，按每1ml冻存液含1×106~1×107个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中，标注好名称、代数、日期等信息。
将要冻存的细胞置于程序降温盒中，-80度冰箱中过夜，之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。
从2011年开始我们致力于在生命科学领域、生物医学实验外包及论文润色服务，协助客户各类实验服务及论文润色十多年，是您值得信赖的科研合作伙伴!
如果您受时间、试验条件等限制而无法完成您的课题研究，欢迎您与我们联系。
实验代做服务：
免疫组化ihc染色实验服务
细胞、组织tunel凋亡染色实验服务
试剂盒免费代检测
实验室代做实验项目
透射电镜服务实验服务
石蜡/冰冻切片tunel凋亡
核仁组成区嗜银-agnor染色实验服务
免疫共沉淀（chirp）实验
rna结合蛋白免疫沉淀（rip）实验代做
酶联免疫（elisa）技术服务
鸡传染性法氏囊病病毒vp2抗体诊断试剂盒
喹诺酮类快速检测试剂盒
组织芯片/微阵列定制技术服务
染色质免疫沉淀分析(clip)实验服务
多因子液相芯片技术（luminex）实验
免疫细胞化学icc实验服务
atp/adp检测实验服务
蛋白双向(2-d)电泳实验服务
蛋白相互作用分析
碱性磷酸酶染色实验服务
pkc活性检测实验
非标定量实验
（label-free）
dige技术实验服务
端粒酶活性检测实验
细胞生长曲线的测定
扫描电镜服务
nf-kb p65活性检测实验
慢病毒包装实验服务
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规格：1x106
细胞介绍
来源于人类腺癌的肺组织，至今仍有分化。
细胞特性
1）来源：人，肺腺癌组织
2）形态：上皮样，多数贴壁少量悬浮，
3）含量：>1x106细胞数
4）规格：t25瓶或者1ml冻存管包装
5）用途：仅供科研使用。
一．细胞处理：
1）冻存细胞的复苏：
将含有1ml细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入到含4-6ml完全培养基的离心管中混合均匀。在1000rpm条件下离心3-5min，弃去上清液，完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶（或皿）中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达70%-90%，即可进行传代培养。
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1. 收集：将培养瓶中的悬浮的细胞收集到离心管中。用不含钙、镁离子的pbs润洗细胞1-2次。由于细胞贴壁不牢pbs润洗后细胞会脱落所以pbs也要回收到离心管中。
2. 加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mm edta于培养瓶中（t25瓶1-2ml，t75瓶2-3ml）置于37℃培养箱中消化1-2分钟（难消化的细胞可以适当延长消化时间），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%fbs的培养基来终止消化。
3. 将收集到的悬浮细胞、pbs清洗液中的细胞和消化下来的贴壁细胞以1000rpml离心5min，弃去上清，补加1-2ml培养液后重悬混匀后将细胞悬液按1：2的比例分到新t25瓶中，添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力，后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
3）细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。
下面t25瓶为例；
1.细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中，可使用血球计数板计数，来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×106~1×107个活细胞/ml.
2.1000rpm离心3-5min，去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞 ，按每1ml冻存液含1×106~1×107个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中，标注好名称、代数、日期等信息。
将要冻存的细胞置于程序降温盒中，-80度冰箱中过夜，之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。
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