嵌合抗体的基本原理及类型
嵌合抗体一般是指将一个物种的抗体恒定区换成另一个物种的。zui早使用此项技术是将鼠抗体改造为人鼠嵌合抗体。嵌合抗体既保留了亲本抗体特异性结合抗原的能力，又减少了鼠源抗体在人体中的免疫原性，其半衰期明显延长，且在介导cdc及adcc方面亦明显增强。
人-鼠嵌合抗体：利用dna重组技术将鼠源单抗的轻链、重链可变区插入含有人抗体恒定区的表达载体中，转化哺乳动物细胞进行表达所产生的单克隆抗体（图1）。人-鼠嵌合抗体的人源化程度可达到70%，完整的保留了鼠源单抗的可变区及亲本活性，人抗体恒定区的引入则降低了免疫原性。
基本原理：
人鼠嵌合抗体基本原理是从分泌某种鼠单抗的杂交瘤细胞基因组中分离并鉴定出重排的功能性鼠vl（轻链可变区）和vh（重链可变区），经过基因重组分别与人的cl（轻链恒定区）和ch（重链恒定区）区基因按照一定的方式相拼接，克隆到表达载体中构建鼠/人轻重链基因表达载体，并转入适当的宿主细胞表达来制备特异性嵌合抗体。
对于其他类型的人源化抗体，其优势在于，技术路线简单，易于操作；抗体完整性好，在体内滞留时间长；鼠源抗体的亲和力和特异性都得到保留，在临床上得到了良好的反应。
构建人鼠嵌合抗体主要包括：克隆鼠抗体可变区基因，钓取人抗体恒定区基因，拼接鼠抗体可变区基因与人抗体恒定区基因以及构建载体和宿主细胞。
嵌合抗体的分类
嵌合抗体主要有三种类型：
1、嵌合igg抗体
目前嵌合抗体的研究主要集中在嵌合igg（immunoglobulin g）抗体。其构建基本原理是从生产某种鼠源单克隆抗体的杂交瘤细胞中得到目的抗体v区（variable region）基因，再与人类的c区（constant region）基因重组并克隆到合适载体中，然后转入受体细胞表达（如图1）。
在构建嵌合抗体时应根据不同目的选择不同的c片段。这是因为不同类型的人抗体c区与补体和fc（fragment crystallizable,fc）相互作用的能力以及引发细胞溶解的功能不尽相同。在体内免疫系统中，抗体的fc段和效应细胞相互作用，发挥特异的生物学功能。例如ige（immunoglobulin e）可介导炎症反应等，igm活化补体的能力强，igg1的补体活化能力比igg3强，且在adcc作用（antibody dependent cell mediated cytotoxicity）触发能力上也比igg3强。在与fc受体的结合能力上igg1和igg3比较强，igg4次之，而igg2几乎检测不到。
2、嵌合fab和f(ab')2抗体
嵌合fab（antigen-binding fragment, fab）和f(ab')2（具有两个抗原结合表位的片段）抗体的优势就是渗透力强。fab嵌合抗体制备原理为：将功能性抗体l,h链的v区基因与人的轻链k和h链ch1进行重组，克隆到表达载体中，在转入宿主细胞表达。不过对于大多数该类型的抗体来说，由于亲和力较低，分子量小，容易被肾小球过滤而从血液中消失，因此大多数不适合单独使用于临床治疗。
为了改善效果，人们把fab抗体改造成嵌合f(ab')2抗体，提高了其分子量，其药代动力学也有所改善，取得了一定的治疗效果。
义翘神州提供嵌合抗体生产服务，内容包括：
①基因合成及密码子优化
客户可提供抗体序列或质粒作为起始材料。
②载体构建
分别克隆抗体重链、轻链至优化的表达载体
测序验证
质粒生产
③表达及纯化
瞬时转染hek293/cho 细胞
纯化抗体
精细纯化（依据需求进行）
④qc分析
sds-page
uv
sec-hplc (可选)
⑤交付内容
纯化抗体
质量检验报告 (coa)
更多嵌合抗体生产服务详情可以登录义翘神州！
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对于其他类型的人源化抗体，其优势在于，技术路线简单，易于操作；抗体完整性好，在体内滞留时间长；鼠源抗体的亲和力和特异性都得到保留，在临床上得到了良好的反应。
构建人鼠嵌合抗体主要包括：克隆鼠抗体可变区基因，钓取人抗体恒定区基因，拼接鼠抗体可变区基因与人抗体恒定区基因以及构建载体和宿主细胞。
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1、嵌合igg抗体
目前嵌合抗体的研究主要集中在嵌合igg（immunoglobulin g）抗体。其构建基本原理是从生产某种鼠源单克隆抗体的杂交瘤细胞中得到目的抗体v区（variable region）基因，再与人类的c区（constant region）基因重组并克隆到合适载体中，然后转入受体细胞表达（如图1）。
在构建嵌合抗体时应根据不同目的选择不同的c片段。这是因为不同类型的人抗体c区与补体和fc（fragment crystallizable,fc）相互作用的能力以及引发细胞溶解的功能不尽相同。在体内免疫系统中，抗体的fc段和效应细胞相互作用，发挥特异的生物学功能。例如ige（immunoglobulin e）可介导炎症反应等，igm活化补体的能力强，igg1的补体活化能力比igg3强，且在adcc作用（antibody dependent cell mediated cytotoxicity）触发能力上也比igg3强。在与fc受体的结合能力上igg1和igg3比较强，igg4次之，而igg2几乎检测不到。
2、嵌合fab和f(ab')2抗体
嵌合fab（antigen-binding fragment, fab）和f(ab')2（具有两个抗原结合表位的片段）抗体的优势就是渗透力强。fab嵌合抗体制备原理为：将功能性抗体l,h链的v区基因与人的轻链k和h链ch1进行重组，克隆到表达载体中，在转入宿主细胞表达。不过对于大多数该类型的抗体来说，由于亲和力较低，分子量小，容易被肾小球过滤而从血液中消失，因此大多数不适合单独使用于临床治疗。
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