氨基酸纤维素薄层层析
一、目的
学习纤维素薄层层析的操作方法，掌握分配层析的原理。
二、原理
以纤维素作为支持物，把它均匀地涂布在玻璃板上成一薄层，然后在此薄层上进行层析即为纤维素薄层层析。纤维素是一种惰性支持物，它与水有较强的亲和力而与有机溶剂亲和力较弱。层析时吸着在纤维素上的水是固定相，而展层溶剂是流动相。当欲被分离的各种物质在固定相和流动相中的分配系数不同时，它们就能被分离开。
三、实验材料、仪器和试剂
1．实验材料
绿豆芽或萌发小麦种子
2．仪器
烧杯50ml×1；玻璃板5 cm×20cm×1；层析缸；毛细管；喷雾器；研钵。
3．试剂
标准氨基酸溶液：丝氨酸、色氨酸、亮氨酸，分别以0.01mol/l 盐酸配成4mg/ml 的溶液。
纤维素粉（层析用）或微晶型纤维素（层析用）；羧甲基纤维素钠（cmc）。层析溶剂系统：正丁醇（分析）﹕冰醋酸（分析）﹕水＝4﹕1﹕1（v/v）。显色剂：0.1％茚三酮-丙酮溶液。
四、操作步骤
1．氨基酸的提取
取已萌发好的小麦种子2g（或绿豆芽下胚轴2g），放入研钵中，加95％乙醇4ml 及少量的石英砂，研成匀浆后，倒入离心管中离心3 000r/min、15min，上清液即为氨基酸提取液，用滴管小心吸入点样瓶中备用。
2．制板
取少量羧甲基纤维素钠（约12mg），置研钵中充分研磨，再称取纤维素粉3g 于研钵中研磨，再加入14ml 水研磨匀浆，把纤维素匀浆倒在洗净烘干的玻璃板上，轻轻震动，使纤维素均匀分布在玻璃板上，水平放置风干，用前放入100～110℃干燥箱中活化30min。此处羧甲基纤维素钠是起粘合剂作用，它使纤维素粉能较牢固地粘附于玻璃板上，加入量过多会破坏纤维素薄层的毛细作用而使层析速度延缓，加的量过少则粘合不牢固，因此需要注意加量控制。
3．点样
用刀片将薄层板上薄层的左右各边刮削掉0.5cm，以防止“边缘效应”。在纤维素薄板上距一端15mm 处，用铅笔轻轻划出点样记号。样点之间距离1.3cm。用毛细管吸取样品，在记号处点样，样品斑点直径控制在2mm 左右。
4．展层
将薄板有样品的一端浸入已存放展层溶剂的层析缸中，层析溶剂液面不能高于样品线。待展层溶剂走到距薄板顶端0.5～1cm 时取出此薄板（约1～2h），用铅笔在前沿处作一记号后用电吹风吹干。
5．显色
将茚三酮显色剂喷雾在板上，用热吹风吹数分钟，（或置于70～80℃干燥箱中烘干）即可观察到紫红色的氨基酸斑点，脯氨酸例外，为黄色斑点。用铅笔圈出氨基酸斑点，量出溶剂前沿的距离及各斑点中心与起点之间的距离，并计算各氨基酸的rf 值。rf 值为迁移率（rate of flow, rf），在恒定条件下，每种氨基酸有其一定的rf 值。
根据已知标准氨基酸和rf 值，与小麦（或绿豆芽）提取液中氨基酸的rf 值比较，确定提取液中含有哪些种氨基酸。
五、附 注
1．在操作过程中，手必须洗净，只能接触薄板上层边角；不能对着薄板说话，以防唾液掉在板上。
2．配制展层剂时，要用纯溶剂，应现用现配，以免放置过久其成分发生变化（酯化）。
气相色谱仪厂家使用经验总结
锯床常出现的几种故障的分析
F24-12D禹鼎无线遥控器工作环境温度
力士乐溢流阀DBW20B1-5X/315-EW230N9K4现货
小肠结肠炎耶尔森氏菌（PCR-荧光探针法）实验引物原则
氨基酸纤维素薄层层析
岩心渗透率测定仪要怎么用才正确？
调剂供应二手硫酸钠二效强制循环蒸发结晶器
高温电炉等各种高温炉的加热特点
颜色基础知识-CIE 1976 LAB L*a*b*色空间
恒温恒湿试验箱水雾从哪而来
花生剥壳机使用注意事项和保养
电动刀型闸阀PZ973H电动插板阀闸板阀的特点
实验室家具中包含了哪些设备及实用功能
BDA08024CS-stasto电磁阀线圈
GSB04-3772-2020 铝合金光谱单点标准样品 质控品
吹瓶机使用前需要做哪些准备工作？
胶水浆料气泡抽出设备
多功能滤油机的用途简介
环境空气颗粒物自动监测手工比对核查解决方案
学习纤维素薄层层析的操作方法，掌握分配层析的原理。
二、原理
以纤维素作为支持物，把它均匀地涂布在玻璃板上成一薄层，然后在此薄层上进行层析即为纤维素薄层层析。纤维素是一种惰性支持物，它与水有较强的亲和力而与有机溶剂亲和力较弱。层析时吸着在纤维素上的水是固定相，而展层溶剂是流动相。当欲被分离的各种物质在固定相和流动相中的分配系数不同时，它们就能被分离开。
三、实验材料、仪器和试剂
1．实验材料
绿豆芽或萌发小麦种子
2．仪器
烧杯50ml×1；玻璃板5 cm×20cm×1；层析缸；毛细管；喷雾器；研钵。
3．试剂
标准氨基酸溶液：丝氨酸、色氨酸、亮氨酸，分别以0.01mol/l 盐酸配成4mg/ml 的溶液。
纤维素粉（层析用）或微晶型纤维素（层析用）；羧甲基纤维素钠（cmc）。层析溶剂系统：正丁醇（分析）﹕冰醋酸（分析）﹕水＝4﹕1﹕1（v/v）。显色剂：0.1％茚三酮-丙酮溶液。
四、操作步骤
1．氨基酸的提取
取已萌发好的小麦种子2g（或绿豆芽下胚轴2g），放入研钵中，加95％乙醇4ml 及少量的石英砂，研成匀浆后，倒入离心管中离心3 000r/min、15min，上清液即为氨基酸提取液，用滴管小心吸入点样瓶中备用。
2．制板
取少量羧甲基纤维素钠（约12mg），置研钵中充分研磨，再称取纤维素粉3g 于研钵中研磨，再加入14ml 水研磨匀浆，把纤维素匀浆倒在洗净烘干的玻璃板上，轻轻震动，使纤维素均匀分布在玻璃板上，水平放置风干，用前放入100～110℃干燥箱中活化30min。此处羧甲基纤维素钠是起粘合剂作用，它使纤维素粉能较牢固地粘附于玻璃板上，加入量过多会破坏纤维素薄层的毛细作用而使层析速度延缓，加的量过少则粘合不牢固，因此需要注意加量控制。
3．点样
用刀片将薄层板上薄层的左右各边刮削掉0.5cm，以防止“边缘效应”。在纤维素薄板上距一端15mm 处，用铅笔轻轻划出点样记号。样点之间距离1.3cm。用毛细管吸取样品，在记号处点样，样品斑点直径控制在2mm 左右。
4．展层
将薄板有样品的一端浸入已存放展层溶剂的层析缸中，层析溶剂液面不能高于样品线。待展层溶剂走到距薄板顶端0.5～1cm 时取出此薄板（约1～2h），用铅笔在前沿处作一记号后用电吹风吹干。
5．显色
将茚三酮显色剂喷雾在板上，用热吹风吹数分钟，（或置于70～80℃干燥箱中烘干）即可观察到紫红色的氨基酸斑点，脯氨酸例外，为黄色斑点。用铅笔圈出氨基酸斑点，量出溶剂前沿的距离及各斑点中心与起点之间的距离，并计算各氨基酸的rf 值。rf 值为迁移率（rate of flow, rf），在恒定条件下，每种氨基酸有其一定的rf 值。
根据已知标准氨基酸和rf 值，与小麦（或绿豆芽）提取液中氨基酸的rf 值比较，确定提取液中含有哪些种氨基酸。
五、附 注
1．在操作过程中，手必须洗净，只能接触薄板上层边角；不能对着薄板说话，以防唾液掉在板上。
2．配制展层剂时，要用纯溶剂，应现用现配，以免放置过久其成分发生变化（酯化）。
气相色谱仪厂家使用经验总结
锯床常出现的几种故障的分析
F24-12D禹鼎无线遥控器工作环境温度
力士乐溢流阀DBW20B1-5X/315-EW230N9K4现货
小肠结肠炎耶尔森氏菌（PCR-荧光探针法）实验引物原则
氨基酸纤维素薄层层析
岩心渗透率测定仪要怎么用才正确？
调剂供应二手硫酸钠二效强制循环蒸发结晶器
高温电炉等各种高温炉的加热特点
颜色基础知识-CIE 1976 LAB L*a*b*色空间
恒温恒湿试验箱水雾从哪而来
花生剥壳机使用注意事项和保养
电动刀型闸阀PZ973H电动插板阀闸板阀的特点
实验室家具中包含了哪些设备及实用功能
BDA08024CS-stasto电磁阀线圈
GSB04-3772-2020 铝合金光谱单点标准样品 质控品
吹瓶机使用前需要做哪些准备工作？
胶水浆料气泡抽出设备
多功能滤油机的用途简介
环境空气颗粒物自动监测手工比对核查解决方案