科研小知识∣昆虫细胞的转染试剂应当如何选择？
转染试剂主要作用是辅助将质粒、dna、sirna、mirna或蛋白质等外源物质输送到细胞内部，目前已成为研究和控制真核细胞基因功能的常规试剂。令人担忧的是，现在市面上的转染试剂种类繁多，质量参差不齐，那我们应该如何选择一款适用于自己实验的转染试剂呢？
作为一名以前也常用转染试剂做实验的老师姐，我认为非常有必要拿出我很爱的一款转染试剂推荐给大家。一款专门用于昆虫细胞的转染以及高滴度重组杆状病毒的生产的转染试剂。
昆虫细胞表达是一种用于产生具有简单翻译后修饰的蛋白质的平台。瞬时转染和重组杆状病毒的产生是昆虫细胞表达的常用方法。transit®-insect是一种无动物来源的转染试剂，专门针对各种昆虫细胞类型的高基因表达进行了优化。
产品性能：
特殊的dna递送—在昆虫细胞类型中，包括sf9、high five™ 和s2
图1. 使用transit®-insect高效转染杆状病毒基因组dna。6孔板里进行转染，每孔5 x 105sf9细胞，质粒和转染试剂比例1：3，使用0.5ug表达gfp的progreen™杆状病毒表达载体（ab vector）和0.1 µg的pvl1393 转移载体(ab vector). (a)转染后6天使用zeiss s100荧光显微镜拍摄荧光和相位对比图像。(b) merge。
图2. transit®-insect的性能优于竞争对手的转染试剂。昆虫细胞系（a）sf9，（b）high five™, 和（c）果蝇s2细胞，在96孔板中用0.1µg由hr5增强子/ie1启动子驱动的荧光素酶表达质粒进行转染，使用指ding试剂以zhi定试剂与dna的比例（µl:µg）转染。在转染后48小时测量萤光素酶的表达。sf9和high five™在无血清培养基配方中培养和转染细胞；s2细胞在含有血清的培养基中。误差条表示三次复孔平均值的标准误差。
杆状病毒产量高—昆虫细胞中表达杆状病毒的理想选择
图3. 使用transit®-insect在high five中的高效表达重组蛋白 。在6孔板中用2.5µg由hr5增强子/ie1启动子驱动的gfp表达质粒转染进high five™ 细胞（thermo fisher scientific） 。从转染后72小时的细胞制备总可溶性细胞裂解物。通过sds-page和考马斯蓝染色分析来自100µl培养物的裂解物；cells alone（未转染）作为对照。
gfp-6xhis-s-hsv（*，~38kda）在来自用transit®-insect（mirus bio）转染的细胞
用transit®-insect 和dna比例为2:1进行转染，观察到高水平的表达。在转染细胞的裂解物中清楚地检测到含有6x his、s和hsv标签（~38kda）的表达gfp（*）。
图4. 使用transit®-insect高效表达蛋白。昆虫细胞系(a) sf9，(b) high five™和(c)果蝇s2在96孔板中转染 0.1 ug的荧光素酶表达质粒，转染试剂与质粒的比例为2:1。在转染后24、48和72小时三个时间点检测荧光素酶的表达。sf9和high five™细胞在无血清培养基中培养和转染；s2细胞置于含血清的培养基中。
血清兼容—无动物来源的非脂质体配方，
性价比高—每次转染所需的试剂量较低
部分应用文献展示：
#1：establishment of a pseudovirus platform for neuraminidase inhibiting antibody analysis.international journal of molecular sciences (2023)24:2376
cell line：sf21
#2：microrna mir-274-5p controls melanotic mass formation and developmental growth by regulating the found-in-neurons-jnk signaling axis in drosophila.preprints (2023).
cell type:s2
#3：baculovirus actin-based motility drives nuclear envelope disruption and nuclear egress.current biology (2018).
cell line :high five
#4：mir-34-5p, encoded by spodoptera frugiperda, participates in anti-baculovirus by regulating innate immunity in the insect host.international journal of biological macromolecules (2022)222:2190
cell type:s9
订购信息：
产品名称 货号 规格
transit®-insect mir6104 0.4ml
mir6100 1ml
mir6105 5*1ml
mir6106 10*1ml
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昆虫细胞表达是一种用于产生具有简单翻译后修饰的蛋白质的平台。瞬时转染和重组杆状病毒的产生是昆虫细胞表达的常用方法。transit®-insect是一种无动物来源的转染试剂，专门针对各种昆虫细胞类型的高基因表达进行了优化。
产品性能：
特殊的dna递送—在昆虫细胞类型中，包括sf9、high five™ 和s2
图1. 使用transit®-insect高效转染杆状病毒基因组dna。6孔板里进行转染，每孔5 x 105sf9细胞，质粒和转染试剂比例1：3，使用0.5ug表达gfp的progreen™杆状病毒表达载体（ab vector）和0.1 µg的pvl1393 转移载体(ab vector). (a)转染后6天使用zeiss s100荧光显微镜拍摄荧光和相位对比图像。(b) merge。
图2. transit®-insect的性能优于竞争对手的转染试剂。昆虫细胞系（a）sf9，（b）high five™, 和（c）果蝇s2细胞，在96孔板中用0.1µg由hr5增强子/ie1启动子驱动的荧光素酶表达质粒进行转染，使用指ding试剂以zhi定试剂与dna的比例（µl:µg）转染。在转染后48小时测量萤光素酶的表达。sf9和high five™在无血清培养基配方中培养和转染细胞；s2细胞在含有血清的培养基中。误差条表示三次复孔平均值的标准误差。
杆状病毒产量高—昆虫细胞中表达杆状病毒的理想选择
图3. 使用transit®-insect在high five中的高效表达重组蛋白 。在6孔板中用2.5µg由hr5增强子/ie1启动子驱动的gfp表达质粒转染进high five™ 细胞（thermo fisher scientific） 。从转染后72小时的细胞制备总可溶性细胞裂解物。通过sds-page和考马斯蓝染色分析来自100µl培养物的裂解物；cells alone（未转染）作为对照。
gfp-6xhis-s-hsv（*，~38kda）在来自用transit®-insect（mirus bio）转染的细胞
用transit®-insect 和dna比例为2:1进行转染，观察到高水平的表达。在转染细胞的裂解物中清楚地检测到含有6x his、s和hsv标签（~38kda）的表达gfp（*）。
图4. 使用transit®-insect高效表达蛋白。昆虫细胞系(a) sf9，(b) high five™和(c)果蝇s2在96孔板中转染 0.1 ug的荧光素酶表达质粒，转染试剂与质粒的比例为2:1。在转染后24、48和72小时三个时间点检测荧光素酶的表达。sf9和high five™细胞在无血清培养基中培养和转染；s2细胞置于含血清的培养基中。
血清兼容—无动物来源的非脂质体配方，
性价比高—每次转染所需的试剂量较低
部分应用文献展示：
#1：establishment of a pseudovirus platform for neuraminidase inhibiting antibody analysis.international journal of molecular sciences (2023)24:2376
cell line：sf21
#2：microrna mir-274-5p controls melanotic mass formation and developmental growth by regulating the found-in-neurons-jnk signaling axis in drosophila.preprints (2023).
cell type:s2
#3：baculovirus actin-based motility drives nuclear envelope disruption and nuclear egress.current biology (2018).
cell line :high five
#4：mir-34-5p, encoded by spodoptera frugiperda, participates in anti-baculovirus by regulating innate immunity in the insect host.international journal of biological macromolecules (2022)222:2190
cell type:s9
订购信息：
产品名称 货号 规格
transit®-insect mir6104 0.4ml
mir6100 1ml
mir6105 5*1ml
mir6106 10*1ml
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