液相色谱梯度洗脱的原理和配置特点
梯度洗脱是指在同一个分析周期中随着时间的变化按一定程序梯度性地改变洗脱液的比例(浓度配比、成分、离子度、溶液性等)或ph，以期将层析柱上不同的组分洗脱出来的方法。从而可以使一个复杂样品中性质（性）差异较大的组分能按各自适宜的容量因 子k达到良好的分离目的。梯度洗脱一般分为二元压梯度，二元低压梯度和四元低压梯度；二元压梯度需要两台压泵，二元低压梯度和四元低压梯度都是只需要一台压泵和一个比列阀。
梯度洗脱的原理如下：
具体地讲，当样品随梯度起点的流动相进入色谱柱入口时，由于起点流动相中弱洗脱溶剂a含量较，洗脱溶剂b含量较低，化合物c1(保留性适中)和化合物c2(保留较)因分配系数(k值)较而滞留于色谱柱入口附近，几乎未移动。一段时间后，b增加到一定数值，c1的k值达到足够小(比如小于10)，其在柱中的移动速率明显增大，并且随着b的增加，其移动速率愈加快速，直到tc1时流出色谱柱，被检测器检测到并被记录成色谱峰c1，tc1虽然比等度时的保留时间长多，但c1的的平均k值却小，因而色谱峰并未展宽，灵敏度仍处于较水平。b持续增加，在随后的某个时间点，c2的k值也降到10以下，c2的移动速率也开始变快，以与c1类似的方式于tc2被洗脱出色谱柱，其平均k值同样小，色谱峰亦未展宽，灵敏度处于较水平。
流动相的梯度变化即流动相性、ph值等的梯度变化，即洗脱能力成梯度变化。
梯度洗脱配置相对复杂，配置特点：
1. 二元压梯度洗脱需要配置两台压泵，一个混合器及连接管理，配置较，成本；
2. 二元低压梯度洗脱需要配置一台压泵、一个二元比例阀、一台在线脱气机、一个混合器（脱气机和混合器视情况而定，可不选）及连接管路，配置较低，成本较低；
3.四元低压梯度洗脱需要配置一台压泵、一个四元比例阀、一台在线脱气机、一个混合器（视情况而定，可不选）及连接管路，配置较，成本较低。
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