乳汁体细胞计数法
推荐使用体细胞计数仪进行乳汁体细胞计数。体细胞计数法有直接计数法和间接计数法。直接计数法中简便易行的方法是直接用显微镜进行体细胞计数（scc），间接计数法就是后面提到的cmt。法。l主要试剂和材料美蓝染色液：美蓝乙醇饱和溶液30ml.（美蓝2g，95％乙醇100ml），10％氢氧化钠溶液0.1ml，蒸馏水100ml，将上列溶液混合摇匀，过滤后备用。二甲苯、95％乙醇。生物显微镜、载玻片、l0μl。微量加样器（或移液枪）等。2操作方法2.1涂片制备涂布：充分摇匀新鲜乳样，用l0μl微量加样器吸取中部乳汁l0μl，或用接种环蘸取等量的乳汁，将乳样滴于玻片一端中侧，仔细涂布成约lcm2。面积的乳膜（为便于操作，可在玻片下垫衬一张硬纸板，纸板上用毛笔划数个面积为lcm2的方格透视）。干燥、脱脂、固定：涂好乳膜的玻片于37℃温箱中干燥，然后用二甲苯脱脂5min，再置95％乙醇中固定5～10min。染色：玻片干燥后，用美蓝染色液染色5min。水洗，再用95％乙醇脱色数分钟，水洗干燥后镜检。镜检及计数：在生物显微镜油镜下观察（*好用l0×目镜，其视野直径要求为0.016），计数100个视野内的细胞数，然后用下式计算：scc=100xn／лr2视野面积лr2=3.1416×（0.016／2）2。=0.0002cm2，显微镜系数n=i／0.0002×100=500,000scc=系数×每个视野的细胞平均数（即细胞总数÷100）：细胞数／ml乳。3判定标准随着和国内乳品行业的接轨，国内标准也在提高，一般以每毫升牛奶中含20万个细胞为亚临床**炎的临界值（+）；超过该值为阳性，低于该值则正常。
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