EZElisa雌二醇ELISA试剂盒参数分析&样品制备方案

雌二醇(e2)是一种类固醇激素,属于雌激素,也是主要的女性性激素。它以及在调节发情和月经女性生殖周期方面起着重要作用。雌二醇在青春期、成年期和妊娠期间对于女性生殖组织(如乳房、子宫和阴道)的发育和维持至关重要,但它也对许多其他组织产生重要影响,包括骨骼、脂肪、皮肤、肝脏和大脑。虽然男性的雌激素水平较女性低,但雌激素在男性中也有重要功能。它存在于大多数脊椎动物、甲壳动物、昆虫、鱼类和其他动物物种中。该试剂盒采用竞争性抑制酶免疫测定技术。所提供的微孔板已经预包被了特异性抗雌二醇抗体。标准品或样品与辣根过氧化物酶(hrp)偶联的雌二醇一起加入到微孔板的孔中。竞争性抑制反应在hrp标记的雌二醇与未标记的雌二醇与抗体之间展开。将底物溶液加入到孔中,颜色的发展与样品中雌二醇的含量相反。停止颜色的发展并测量颜色的强度。
艾美捷ezelisa雌二醇elisa试剂盒基本参数:
目录号:d-aek0003
规格:48t/96t
储存:在4°c下储存12个月,避光。
检测范围:40 pg/ml-1,000 pg/ml
灵敏度:40 pg/ml
精密度:内部试验精密度:变异系数(cv)<15%。间接试验精密度:变异系数(cv)<15%
恢复率:恢复率范围为85%至115%,总体平均恢复率为100%
特异性:ezelisa™雌二醇(e2)elisa试剂盒对雌二醇的检测具有高灵敏度和优异的特异性。未观察到雌二醇与类似物之间的显著交叉反应或干扰。
适用样品:血清、血浆
供应材料和储存条件:
note: std1: 0 pg/ml; std2: 40 pg/ml; std3: 100 pg/ml; std4: 200 pg/ml; std5: 400 pg/ml; std6;1,000 pg/ml.
ezelisa雌二醇elisa试剂盒试剂准备:
注意:使用前将所有试剂平衡至室温。按照微孔板读数仪的说明进行设置,并在测量光密度之前预热15分钟。
1×洗涤缓冲液:将洗涤缓冲液(20×)用去离子水稀释1:20,得到1×洗涤缓冲液。储存在4°c。如果洗涤缓冲液浓缩物中形成了结晶,请轻轻加热至完-全溶解。储存在室温下。请注意,1×洗涤缓冲液稳定期为30天。
工作溶液:根据辣根过氧化物酶偶联的雌二醇的体积取相应的检测缓冲液1/10,并与辣根过氧化物酶偶联的雌二醇混合,得到工作溶液,使用前进行混合。例如:取3 ml辣根过氧化物酶偶联的雌二醇,加入0.3 ml检测缓冲液,混合得到工作溶液。
ezelisa雌二醇elisa试剂盒样品制备:
1.血清:使用血清分离管,在室温下凝固样品30分钟后,以1,000 g的速度离心15分钟。立即使用血清进行检测,或将样品分装并储存在-20°c。避免反复冻融循环。
2.血浆:使用edta、肝素或柠檬酸盐作为抗凝剂收集血浆。在采集后30分钟内以1,000 g的速度离心15分钟。立即进行检测,或将样品分装并储存在-20°c。避免反复冻融循环。
注意:不要使用明显溶血或脂肪乳化的样本。如果样品将在24小时内使用,可以储存在2到8°c。避免反复冻融循环。在进行检测前,应将冷冻样品缓慢恢复至室温,并轻轻混匀。
程序分析:
1.从微孔板架上取下多余的微孔板条,将它们放回包含干燥剂包的铝箔袋中,并重新密封。
2.每个孔中加入50 μl标准品或样品。建议将所有标准品和样品都复制加入微孔板中。设置一个空白孔,不加入任何溶液。
3.向每个孔中加入50 μl工作溶液(空白孔除外),充分混匀,用提供的孔盖盖好,然后在37°c下孵育1小时。
4.倒掉每个孔中的液体并进行洗涤,总共洗涤三次。使用多通道移液器或自动微孔板洗涤器,将每个孔填满1×洗涤缓冲液(250 μl),静置10秒钟,每个步骤中完-全去除液体对良好的性能至关重要。在最后一次洗涤后,倒转孔板并用干净的纸巾轻轻拍干任何剩余的1×洗涤缓冲液。
5.向每个孔中加入50 μl hrp底物a和50 μl hrp底物b,充分混匀,并用提供的孔盖盖好。在37°c下孵育15分钟。将孔板放在黑暗中,远离气流和其他温度波动。
6.向每个孔中加入50 μl停止溶液。停止溶液应按照hrp底物的加入顺序加入到孔板中。孔中的颜色应从蓝色变为黄色。如果孔中的颜色是绿色,或者颜色变化不均匀,请轻轻敲击孔板以确保充分混合。
7.在30分钟内使用设置为450 nm的微孔板读数仪测定每个孔的光密度。
该试剂仅用于科学研究领域,不适用于临床诊断或其他用途。

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