iTRAQ(TMT)-多通量定量分析服务

一、itraq(tmt)-多通量定量分析服务简介:
itraq (isobaric tag for relative and absolute quantitation) 和 tmt(tandem mass tag) 分别是由ab sciex和thermo scientific公司分别开发的、对trypsin酶解肽段进行标记的试剂盒。标记肽段通过lc-ms,能同时实现对蛋白质的鉴定和对蛋白质的相对定量分析。
itraq和tmt的技术原理*一样,区别在于:(1)生产商不同;(2)分子结构稍有差异;(3)标记通量有差异。itraq有4标(4-plex)和8标(8-plex)2种规格,tmt有2标(2-plex)、6标(6-plex)和10标(10-plex)等3种规格。itraq/tmt标记通量多样,为实验设计提供了更多的选择性,有利于用户根据自己的样品数量,选择合适的标记方案。
itraq/tmt技术的优势是能同时分析8-10组样品,实验周期短。但其不足体现在实验步骤多,系统误差较大。
整体服务方案:
客户只需提供样本即可。我方负责完成后续所有实验,包括:
蛋白质提取与trypsin酶解。
酶解肽段itraq/tmt标记与混合。
混合肽段hplc分离,收集馏分。
对每个馏分进行lc-ms测试。
ms数据定性及定量分析,筛选差异表达的蛋白质。
差异表达蛋白常规生物信息学分析。
我方该服务的优势体现在:(1)样品通常分为15个馏分;(2)每个流程lc-ms测试时间为2h,共计测试15×2=30h。馏分和测试时间的增加,能显著提高蛋白质鉴定数目和蛋白质定量的准确度。

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