高效液相色谱法基本原理

1 基本概念:
色谱峰参数:峰高或峰面积(用于定量)峰位(保留值表示用于定性) 峰宽(用于衡量柱效)保留值:保留时间、死时间、调整保留时间
峰宽:标准差、半峰宽、峰宽,色谱峰展宽是指由于柱内外各种因素引起的色谱峰变宽或变形,从而造成柱效降低,
2.塔板理论:把组分在两相间的连续转移过程,分解为间歇的在单个塔板中的分配平衡过程:
理论塔板数n=5.54 (tr/wh/2)2
色谱柱的理论塔板数越多,柱效越高,同样长度中塔板高度越小,柱效越高。
3.速率理论:主要说明使色谱峰扩张而降低柱效的因素
范氏方程h=a b/μ cμ
a为涡流扩散项。采用适当粒度、均匀的填料并填充均匀可减小涡流扩散。
b为纵向扩散系数。流动相为液体,柱温为室温b,μ可忽略不计。
c为传质阻抗系数。在能*覆盖载体表面的前提下,应适当减少固定液用量。

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