带正电荷的 nanogold®可以参与许多不同的标记反应。
如果您想要缀合的分子具有羧酸基团(例如肽中的c端),您可以使用肽合成中使用的反应将其与带正电荷的纳米金缀合:使用edc(1-乙基)激活羧酸-3-[3-二甲基氨基丙基]碳二亚胺盐酸盐)和磺基-nhs;您可以从多种来源购买 edc。 edc 与待标记分子上的羧基反应,形成胺反应性 o-酰基异脲中间体。该中间体容易水解,使其在水溶液中的寿命较短。添加磺基-nhs (5 mm) 通过将胺反应性中间体转化为胺反应性磺基 -nhs 酯来稳定胺反应性中间体,从而提高 edc 介导的偶联反应的效率。这种活化的磺基-nhs 酯随后很容易与氨基反应。
或者,带正电的 nanogold® 上的氨基可以使用交联剂激活。显示了两个示例。首先,使用水溶性同双功能交联剂双(磺基-琥珀酰亚胺基)辛二酸酯(bs3)来缀合肽的n端,其中c端已被保护。该过程的一个特点是它提供了相对较长的链接:bs3 的 c8 链被添加到带有胺的丙基上,该胺突出到 nanogold® 颗粒配体壳的外表面之外。在第二个方案中,水溶性异双功能交联剂,磺基-琥珀酰亚胺基 4-[n-马来酰亚胺基-甲基]-环己烷-1-羧酸酯 (sulfo-smcc),用于将胺与马来酰亚胺基团选择性地与硫醇反应。然后使用马来酰亚胺衍生物来标记硫醇化生物分子,例如含有半胱氨酸的肽。多种其他交联剂可用于将胺连接至不同的官能团;
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