M酶联免疫分析-齐一生物
for research use only
仅供研究用
货号：qy-h10226
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中* m(igm)水平。用纯化的人 igm抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入免疫球蛋白 m(igm)，再与 hrp标记的免疫球蛋白 m(igm)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过*洗涤后加底物 tmb显色。tmb在 hrp酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的免疫球蛋白 m(igm)呈正相关。用酶标仪在 450nm波长下测定吸光度（od值），通过标准曲线计算样品中* m(igm)浓度。
操作步骤
标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔 10孔，在*、第二孔中分别加标准品 100μl，然后在*、第二孔中加标准品稀释液 50μl，混匀；然后从*孔、第二孔中各取 100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液 50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取 50μl弃掉，再各取 50μl分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液 50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取 50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液 50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取 50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液 50μl，混匀后从第九第十孔中各取 50μl弃掉。（稀释后各孔加样量都为 50μl，浓度分别为 9μg/ ml，6μg/ ml，3μg/ ml，1.5μg/ ml， 0.75μg/ ml）。加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液 40μl，然后再加待测样品 10μl（样品zui终稀释度为 5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。加酶：每孔加入酶标试剂 50μl，空白孔除外。温育：用封板膜封板后置 37℃温育 30分钟。配液：将 30（48t的 20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30（48t的 20倍）倍稀释后备用。洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置 30秒后弃去，如此重复 5次，拍干。显色：每孔先加入显色剂 a50μl，再加入显色剂 b50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色 10分钟.终止：每孔加终止液 50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。测定：以空白孔调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（od值）。 测定应在加终止液后 15分钟以内进行。注意事项：
1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30 分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间控制在 5分钟内，如标本数量多，*使用排枪加样。
4．请每次测定的同时做标准曲线，做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本od 值大于标准品孔*孔的 od值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请zui后乘以总稀释倍数（×n×5）。
5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6．底物请避光保存。
7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9．本试剂不同批号组分不得混用。
10. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准。
齐一生物科技（上海）有限公司主要经营进口原装elisa试剂盒，自产品牌qiybo试剂盒，并提供免疫分析相关试剂和检测试剂盒。种类齐全，价格实惠，凡购买我公司产品的新老客户，即可享免费代测实验服务，可检测多种属样本。全程提供。如需其他elisa试剂盒说明书及报价，可我公司!
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操作步骤
标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔 10孔，在*、第二孔中分别加标准品 100μl，然后在*、第二孔中加标准品稀释液 50μl，混匀；然后从*孔、第二孔中各取 100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液 50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取 50μl弃掉，再各取 50μl分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液 50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取 50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液 50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取 50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液 50μl，混匀后从第九第十孔中各取 50μl弃掉。（稀释后各孔加样量都为 50μl，浓度分别为 9μg/ ml，6μg/ ml，3μg/ ml，1.5μg/ ml， 0.75μg/ ml）。加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液 40μl，然后再加待测样品 10μl（样品zui终稀释度为 5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。加酶：每孔加入酶标试剂 50μl，空白孔除外。温育：用封板膜封板后置 37℃温育 30分钟。配液：将 30（48t的 20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30（48t的 20倍）倍稀释后备用。洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置 30秒后弃去，如此重复 5次，拍干。显色：每孔先加入显色剂 a50μl，再加入显色剂 b50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色 10分钟.终止：每孔加终止液 50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。测定：以空白孔调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（od值）。 测定应在加终止液后 15分钟以内进行。注意事项：
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