elsd蒸发光散射检测器的应用范围包括:碳水化合物,药物,脂类,甘油三脂,未衍生的脂肪酸和氨基酸,聚合物,表面活化剂,营养滋补品,及组合分子库等。蒸发光散射检测器消除了常见于其他hplc检测器的问题。示差检测受溶剂前沿峰的干扰使得分析复杂化,并且由于温度极其敏感使得基线很不稳定,与梯度洗脱不相容。另外,示差检测器的响应不如elsd灵敏。而低波长紫外检测器在急变梯度条件下受基线漂移的困扰,并要求被分析化合物带有发色团。elsd则不受这些限制。不同于这些检测器,elsd能在多溶剂梯度的情况下获得稳定的基线,使得分辨率更好、分离速度更快。另外,因为elsd的响应不依赖于样品的学特性,所以elsd检测时样品不要求带有发色团或荧光基团。
elsd蒸发光散射检测器操作步骤:
步骤1:雾化
经hplc分离的柱洗脱液进入雾化器,在此与稳定的雾化气体(一般为氮气)混合形成气溶胶。气溶胶由均匀分布的液滴组成,液滴大小取决于分析中采用的气体流量。气体流量越低形成的液滴越大,液滴越大则散射的光越多,从而提高了分析灵敏度,但是越大的液滴在漂移管中越难蒸发。每种方法均存在产生佳信号噪音比率的优化气体流量。流动相流速越低要求适当雾化的气体流量也越低。用内径为2.1mm的微径柱代替内径为4.6mm标准型分析柱,能大大降低流动相流速,因而提高分析的灵敏度。
步骤2:蒸发
气溶胶中挥发性成分在加热的不锈钢漂移管中蒸发。为特定应用设置适当的漂移管温度,取决于流动相组成和流速,以及样品的挥发性。高有机含量流动相比高含水量流动相要求蒸发的漂移管温度低。流动相流速越低比流动相流速越高要求蒸发的漂移管温度越低。半挥发性样品要求采用较低的漂移管温度,以获得佳灵敏度。佳温度需要通过观察各温度时的信号噪音比率来确定。
步骤3:检测
悬浮于流动相蒸汽中的样品颗粒从漂移管进入到光散射检测池。在检测池中,样品颗粒散射激光光源发出的光而蒸发的流动相不散射。散射光被硅光电二极管检测,产生电信号输送模拟信号输出端口,被用于模拟输出的数据采集。
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