淋洗液是对样品进行洗脱的溶液,淋洗离子和样品离子竞争树脂有效交换容量,从而使样品离子产生分离。淋洗液的选择将会影响色谱的分离效果,因此在使用时须根据样品选择合适的淋洗液。
1.淋洗离子的种类、浓度及流速
阴离子色谱的典型淋洗液按洗脱能力由强到弱有碳酸盐、碳酸氢根、氢氧根、硼酸、四碉酸钠,根据被洗脱离子的保留性强弱加以选择。
离子保留性强弱与离子的价态、离子半径、极化度有关。价态越高,保留性越强;离子半径越大,保留性越强;极化度越大,保留性越强。对同一种淋洗液,浓度越大,洗脱能力越强。
增加淋洗液的流速可以缩短保留时间,但要考虑分离度和柱子所能承受的压力。
2.淋洗液的ph值
淋洗液的ph值提高,氢氧根浓度增加,一般情况被测离子保留时间减小;对于弱酸、多元酸,ph值提高,电离增加,保留时间反而增加,如磷酸根。
3.有机改进剂对保留的影响
有机改进剂的作用主要是减少样品离子与离子交换树脂之间的非离子交换作用,占据树脂的疏水性位置,减少疏水性离子在树脂上的吸附,从而缩短保留时间,减少峰拖尾,并增加检测灵敏度。适合半径较大和疏水性强的离子。
添加有机改进剂可以:缩短保留时间,对疏水性的离子影响更大;增加样品的溶解度;改善疏水性和极化离子的色谱峰形;清洗被污染的色谱柱。
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