油红o脂肪染色法是指在日常病理诊断和科研工作中为了显示组织内的脂肪常采用油红o进行染色的方法,油红o为脂溶性染料,在脂肪内能高度溶解,可特异性的使组织内甘油三酯等中性脂肪着色。
在病理检验中,脂类染色法常用以证明脂肪变性,脂肪栓子以及肿瘤的鉴别。脂类染色使用广泛的染料是苏丹染料,常用的有苏丹ⅲ,苏丹ⅳ,苏丹黑及油红o等。苏丹类的油红o染料在脂类中的溶解度大于在有机溶剂的溶解度,所以染色时染料便从染液中转移到被染的脂质中去,使脂质显现出红色。经研究认为组织中脂质在液态或半液态时,对苏丹染料着色效果好。根据这一原理,适当提高温度(37℃-60℃)对组织切片染色效果是有好处的。
实验流程:
1、 固定:将冰冻切片复温干燥10min;细胞爬片4%多聚甲醛固定15min,pbs漂洗3次,5min/次。
2、 染色:入油红o工作液孵育10-15min;细胞爬片破膜10-15min,pbs漂洗3次,5min/次,入油红o工作液37°染色1-2h。
3、 分化:75%酒精分化2s,水洗1min。
4、 复染细胞核:harris苏木素复染1-2min左右,自来水洗,1%的盐酸酒精分化数秒,自来水冲洗,氨水返蓝,流水冲洗。
5、 封片:用纸巾吸去周边水分,甘油明胶封片。染色结果:脂滴呈橘红色至鲜红色,细胞核蓝色。
实验结果展示:
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