通过PCR原理了解PCR仪的关键
通过pcr原理了解pcr仪的关键
pcr就是利用dna聚合酶对特定基因做体外或试管内in vitro的大量合成，基本上它是利用dna聚合酶进行专一性的连锁复制。目前常用的技术，可以将一段基因复制为原来的一百亿至一千亿倍。根据dna扩增的目的和检测的标准，可以将pcr仪分为普通pcr仪，梯度pcr仪，原位pcr仪，实时荧光定量pcr仪四类。那么如何通过pcr原理来了解pcr仪的关键呢，请详细阅读下文！
dna的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链dna在多种酶的作用下可以变性解链成单链，在dna聚合酶的作用下，以单链为模版，根据碱基互补配对原则复制成新的单链，与模版配对成为双链分子挎贝。在体外实验中发现，dna在高温时也可以发生变性解链，当温度降低后又可以复性成为双链。因此，通过温度变化控制dna的变性和复性，并设计与模板dna的5’端结合的两条引物，加入dna聚合酶、dntp就可以完成特定基因的体外复制，多次重复“变性解链—退火—合成延伸”的循环就可以以几何级数大量扩增特定的基因。
发现耐热dna聚合酶对于pcr的应用有里程碑的意义，该类酶可以耐受90℃以上的高温而不失活，不需要每个循环加酶，使pcr技术变得非常简捷、同时也大大降低了成本，pcr技术得以大量应用，并逐步应用于临床。
从pcr原理可以看出，pcr仪的关键是升降温的步骤。
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