pcr基因扩增仪是现代分子生物学中非常重要的技术工具和设备,具有广泛的应用和市场前景。同时,对于研究者和工作者来说,需要深入掌握pcr基因扩增仪的原理、参数设置、操作技巧和质量控制等方面,才能更好地应用和利用这一技术仪器,推动科学的发展和人类的进步。原理是:将dna模板、引物和聚合酶等反应物混合,通过一系列的反应循环,在保证反应物不受污染的情况下,加热使双链dna分离为两个单链,降温使引物在目的基因的两条单链上特异性结合并延伸合成新链,反复循环反应,使得dna数量呈指数状增长,从而达到扩增的目的。
pcr基因扩增仪的技术特点:
1.控温系统:控制系统可以准确地控制温度,使反应在一定范围内稳定进行,保证反应条件准确正确。
2.热盖:通过控制热盖的温度和加热时间,相当于是对反应体系进行“局部消毒”或者“热保护”,避免反应体系中产生的杂质影响反应结果。
3.冷却系统:pcr反应温度通常在95℃~60℃间波动,惯性能量会不断向周围环境释放,导致温度的波动,反应漂移,冷却系统的作用就是保证反应体系的稳定性。
4.连接器:还有一种叫做“连接器”的装置,用于连接热盖和反应管盖,保证热盖与反应管之间的紧密贴合,从而妥善地处理反应盘中反应液的半蒸发、干燥等问题。
pcr基因扩增仪的使用方法:
1.准备反应液:根据反应需要,配置适当的反应体系,具体包括dna模板、引物、聚合酶、缓冲液等,反应物应在零级环境下秤量。保证各反应物质量的洁净和有效性。
2.加热反应体系:将反应体系加热到95℃,使模板dna分离成单链。
3.降温、延伸:将反应体系迅速降温至引物的退火温度,使引物结合到dna模板上,聚合酶沿着模板链向前合成延伸反应产物。
4.可选性扩展阶段:根据反应需要,进行扩展阶段,通常在72℃下进行,目的是为了合成整个产物。
5.结束反应:反应结束后,将反应管从pcr扩增仪中取出,可通过凝胶电泳和其他实验方法进行检测和分析。
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