实时荧光PCR试剂盒的使用注意事项概述

实时荧光pcr试剂盒,对pcr产物进行标记跟踪,实时在线监控反应过程,结合相应的软件可以对产物进行分析,计算待测样品模板的初始浓度。荧光定量pcr技术是通过荧光染料或荧光标记的特异性探针,对pcr产物进行标记跟踪,实时监控反应过程。随着pcr反应的进行,反应产物不断累积,荧光信号强度也等比例增加。每经过一个循环,收集一次荧光强度信号,这样就可以通过荧光强度变化监测产物量的变化,结合相应的软件对产物进行分析,可以得到荧光扩增曲线,计算待测样品初始模版的量。实时荧光定量pcr技术是一次由定性技术向定量技术的飞跃,运用该项技术,可以对dna、rna样品进行相对定量、定量和定性分析。
实时荧光pcr试剂盒概述:
1.是采用sybrgreeni嵌合荧光法进行realtimepcr的试剂。产品中含有realtimepcr反应的适浓度sybrgreeni,进行实验时,pcr反应液的配制十分方便简单。
2.buffer经过优化改良,可以抑制非特异性反应,能够在更广的范围内进行准确定量。
3.可以在宽广的定量区域内得到良好的标准曲线,对目的基因进行准确定量、检测,重复性好,可信度高。
4.其中荧光定量mix中已经添加合适浓度的荧光定量rox校正染料,实验时无需额外添加,直接可以进行rox校正实验。
实时荧光pcr试剂盒注意事项:
1.整个检测过程应严格按照本说明书要求分别在试剂准备区、样本处理区和pcr扩增区进行操作,各区实验服、仪器、耗材应独立使用,不能混用;实验用吸头采用带滤芯吸头;样本处理区应配有生物安全柜,样本处理在生物安全柜中进行操作;三个区应该配有紫外线杀菌装置。
2.为避免rna降解,样本处理过程应在0-4℃条件下操作,且完成实验后立即上机检测;样本处理过程中使用的器具耗材应经过无核酶处理。
3.每次实验应该设置阴、阳性对照。
4.试剂盒所有试剂在使用前应该在常温下充分融化混匀,并应瞬时离心。
5.试剂盒内所配阴性和阳性对照在*次使用前应全部转移至标本准备区,并单独存放。
6.为防止荧光干扰,应避免裸手直接接触pcr反应管,并应避免在pcr反应管上进行任何标记。
7.仪器扩增相关参数应按照本说明书相关要求进行设置;不同批号试剂不能混用。
8.abi系列荧光定量pcr仪参数设置中不选rox校正,淬灭基因选择none。
9.实验过程中产品的废弃物应该进行无害化处理后方可丢弃。
关键词:滤芯吸头 生物安全柜 安全柜

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