zamboni固定液固定时间是多久
zamboni-固定液(zamboni fluid)主要由pa、多聚甲醛、磷酸盐等组成,pa可沉淀蛋白引起组织收缩,但不会使组织硬化, 其与甲醛和乙酸混合后,穿透速度加快,固定均匀,组织收缩轻微,对细胞的微细结构显示的很清晰,为一种良好的固定液。
说明:固定液分为醛类固定液、汞类固定液、醇类固定液、氧化剂类固定液、苦酸盐类固定液等,较为常用的是醛类中的福尔马林、醇类中的乙醇。固定的目的在于保存细胞和组织的原有形态结构,固定剂能阻止内源性溶酶体酶对自身组织和细胞的自溶、抑制细菌和霉菌的生长。
用途:zamboni-固定液是常用的混合型固定液之一,该固定液适用于电镜免疫细胞化学,对超微结构的保存较纯甲醛为优,也适用于光镜免疫细胞化学的研究。固定时间为6-18小时。
操作步骤:(仅供参考)
1. 按实验具体要求操作。
2. 一般仅需固定30~60min。如果组织块大,可适当延长固定时间,但不宜超过24h。
3. 固定后组织可稍微流水冲洗或不冲洗直接转入 70%的乙醇脱水,经乙醇脱水时可除去大部分pa,组织留有一点黄色,对染色也无影响。
微波辐射固定组织。
组织固定的结果是组织中的蛋白质凝固,以保存组织中原有的微细结构。常规固定用的是甲醛或酒精等。但是这些固定剂从某些方面来说其穿透力不很强,因而需要较长时间的固定,另者,临床上的冰冻切片,有的应用快速加热法预先固定组织,造成福尔马林的极度挥发,污染环境,影响人们的身体健康,因此寻找其它固定组织的方法就成为研究的重点。微波辐射固定组织,就是在这种情况下产生的。微波是一种具有能量的电磁波,在其运动期间可产生瞬间热。由于微波的快速运动,也导致了物体部极性分子的快速运动,产生了热量,致使组织蛋白凝固,因此,旧的叫法称微辐射固定组织。按实际的应称为微波辐射凝固蛋白。
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