液相色谱柱分离效果的好坏

液相色谱柱具有高表面覆盖率和*封尾的特点,提高了我们色谱柱的稳定性,适合ph值1.5——10.0很宽范围内的色谱分析。我们对的基质上进行的键合反应进行了特别的优化。*的双封尾技术使我们的色谱柱对中性、极性、酸性和碱性以及螯合化合物的分析具有*的分离效率。
液相色谱柱采用高纯硅胶为基质,键合phenyl(苯基)后可提供*的选择性,对杂环化合物和芳香类化合物有*的选择性和好的分离效果。
液相色谱柱分离效果的好坏:
一、硅胶基质填料
1、正相色谱 正相色谱用的固定相通常为硅胶(silica)以及其它具有极性官能团,如胺基和氰基的键合相填料。由于硅胶表面的硅羟基或其它极性基团极性较强,因此,分离的次序是依据样品中各组分的极性大小,即极性较弱的组份zui先被冲洗出色谱柱。正相色谱使用的流动相极性相对比固定相低,如正己烷,氯仿,二氯甲烷等。
2、反向色谱 反向色谱用的填料常是以硅胶为基质,表面键合有极性相对较弱官能团的键合相。反向色谱所使用的流动相极性较强,通常为水、缓冲液与甲醇、乙腈等的混合物。样品流出色谱柱的顺序是极性较强的组分zui先被冲洗出,而极性较弱的组分在色谱柱上有更强的保留。常用的反向填料有c18、c8、c4等。
二、聚合物填料
聚合物填料多为聚苯乙烯-二乙烯基苯或聚甲基丙烯酸脂等,其重要优点是在ph值为1-14均可使用。相对于硅胶基质的c18填料,这类填料具有更强的疏水性;大孔的聚合物对蛋白质等样品的分离非常有效。现有的聚合特填料的缺点是相对硅胶基质填料,色谱柱柱效较低。
三、其它无机填料
其它hplc的无机填料色谱柱也已经商品化,由于其特殊的性质,一般于特殊的用途。如石墨化碳黑正逐渐成为反向色谱柱填料。这种填料的分离不同于硅胶基质烷基键合相,石墨化碳的表面即是保留的基础,不再需其它的表面改性。该柱填料一般比烷基键合相硅胶或多孔聚合物填料的保留能力更强。石墨化碳可用于分离某些几何异构体,由于在hplc流动相中不会被溶解,这类柱可在任何ph与温度下使用。氧化铝也可以用于hplc。氧化铝微粒刚性强,可制成稳定的色谱柱柱床,其优点是可以在ph高达12的流动相中使用。但由于氧化铝与碱性化合物的作用也很强,应用范围受到一定限制,所以未能广泛应用。新型色谱氧化锆基质填料也可用于hplc。商品化的只有聚全物涂层的多孔氧化锆微球色谱柱,应用ph1-14,温度可达100℃。由于氧化锆填料是zui近几年才开始研究,加之面临的实验难度,其重要用途与优势尚在进行之中。

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