PCR试剂盒使用前后的注意事项
pcr试剂盒里分好几部分，最重要的是pcr反应体系：dna聚合酶，镁离子，引物（测2个基因和1个内标需要3对引物），探针（也要3对探针，发出三种波长的荧光），逆转录酶，dntp（atucg会用部分u代替t），还有用于抗干扰的udg酶（正常的dna只有atcg，pcr扩增出来的dna会有at（会用部分u代替t）cg，这样扩增出来的dna链中有u，udg酶能切断含u的dna链，所以扩增dna在空气中形成的气溶胶，不会影响其他样本）、rna酶抑制剂（空气中液体里全都是rna酶，会降解病毒的rna）、taq酶的抗体（hotstart，常温下能抑制taq酶的活性，pcr扩增时高温让其失活，taq酶就在高温时恢复活性开始扩增了）。
pcr试剂盒注意事项
一、试剂盒使用注意事项
（1）所有试剂应按照适合温度储存。请勿反复冻融。
（2）使用后均需要对操作区进行消毒，消毒方式可以采用75%乙醇或核酸消除剂等。耗材均需使用商品化的无酶耗材。
二、样本注意事项
（1）细胞在含/不含血清的环境中均可直接使用试剂盒。
（2）扩增2kb以内片段，细胞样品浓度不超过1000个细胞。如若扩增片段超过2kb，可适当提高细胞浓度。
（3）不同组织使用不同的眼科剪和眼科镊进行处理，防止交叉污染导致检测结果偏差。
三、试剂盒使用过程中注意事项
（1）pcr过程中推荐使用阴性对照和阳性对照。
（2）整个过程中使用的吸头、离心管等耗材应丢弃在含有75%乙醇或核酸消除剂的容器中，防止形成环境污染。
（4）pcr产物3’末端含有a，可直接进行ta克隆。
四、试剂盒使用后注意事项
（1）pcr反应完成后，严禁在实验区开盖。应在污染区进行琼脂糖凝胶电泳，防止气溶胶污染。
（2）为防止试剂盒污染，请勿将不同批号试剂盒混用。
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pcr试剂盒注意事项
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（1）所有试剂应按照适合温度储存。请勿反复冻融。
（2）使用后均需要对操作区进行消毒，消毒方式可以采用75%乙醇或核酸消除剂等。耗材均需使用商品化的无酶耗材。
二、样本注意事项
（1）细胞在含/不含血清的环境中均可直接使用试剂盒。
（2）扩增2kb以内片段，细胞样品浓度不超过1000个细胞。如若扩增片段超过2kb，可适当提高细胞浓度。
（3）不同组织使用不同的眼科剪和眼科镊进行处理，防止交叉污染导致检测结果偏差。
三、试剂盒使用过程中注意事项
（1）pcr过程中推荐使用阴性对照和阳性对照。
（2）整个过程中使用的吸头、离心管等耗材应丢弃在含有75%乙醇或核酸消除剂的容器中，防止形成环境污染。
（4）pcr产物3’末端含有a，可直接进行ta克隆。
四、试剂盒使用后注意事项
（1）pcr反应完成后，严禁在实验区开盖。应在污染区进行琼脂糖凝胶电泳，防止气溶胶污染。
（2）为防止试剂盒污染，请勿将不同批号试剂盒混用。
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