背景介绍:
铜浓度检测在药物发现和环境监测中得到广泛应用。铜是人体必需的微量元素。铜蛋白酶在铁和儿茶酚胺代谢,在清除自由基,血红蛋白,弹性蛋白,胶原等方面扮演着重要角色。铜主要存在于肝脏中的铜蓝蛋白中。铜含量过低会导致智力低下、色素缺失、贫血、肌肉紧张症、骨质坏血病等疾病。
铜离子检测在肿瘤研究中的应用:
历史研究表明,铜稳态失调与多种肿瘤有关,如妇科肿瘤、结直肠癌等,而癌症患者血清铜水平的升高与癌症分级和化疗耐药性有关,如果铜的浓度超过一定的阈值,就会中毒,导致一种新细胞死亡形式,称为铜中毒,这种方式也被视为癌症治疗的潜在方法。
2023年10月20日,上海市第一人民医院黄陈教授和范广建教授团队在nature communications杂志上发表了题为“lactylation of mettl16 promotes cuproptosis via m6a-modification on fdx1 mrna in gastric cancer”的研究论文。本研究揭示了mettl16调控胃癌细胞铜死亡的分子机制,阐明乳酰化修饰及m6a修饰在胃癌进展中的重要意义,为胃癌的治疗提供新的靶标和策略。
图 运用铜离子检测试剂盒abs580140对48例胃癌患者的胃癌组织裂解物进行了铜含量检测
铜离子检测试剂盒:
试剂盒组分
规格
储存条件
96-well microplate
1 plate
常温
assay buffer
30 ml x 4
4℃
reaction buffer
4 ml x 1
4℃
masking reagent
powder x 1
4℃
dye reagent
powder x 1
4℃,避光保存
dye reagent diluent
1 ml x 1
4℃
standard (250 μmol/l)
1 ml x 1
4℃
另需自备的材料:酶标仪(可读取605nm处的吸光度)、蒸馏水、移液器与枪头、离心机、计时器等。
操作步骤(以组织样本为例):
1、样本处理:称取1g组织,与1ml assay buffer在冰上匀浆,10000g 4℃离心10min,取上清液至新离心管中,冰上保存待检测。
2、试剂准备:
标准品:用蒸馏水二倍连续稀释标准品;
图 标准品二倍连续稀释示例
masking reagent:使用1ml蒸馏水溶解(现配现用);
dye reagent:使用1ml dye reagent diluent溶解dye reagent,70℃加热助溶(现配现用)。
3、上样:分别将140ul不同浓度的标准品、样品加入相应孔中,另设置空白孔加入140ul蒸馏水;每孔分别加入40ul reaction buffer,10ul masking reagent以及10ul dye reagent,混合均匀,室温孵育15min。
试剂
标准品孔
样品孔
空白孔
标准品
140ul
--
--
样品
--
140ul
--
蒸馏水
--
--
140ul
reaction buffer
40ul
40ul
40ul
masking reagent
10ul
10ul
10ul
dye reagent
10ul
10ul
10ul
4、检测与计算:使用酶标仪测量605nm处的吸光度,拟合标准曲线并计算样本浓度。
图 标曲示例
注意事项:
1)金属螯合剂(如edta)会干扰此分析,在样品制备中应避免使用;
2)对于未知的样品,建议多做几个稀释梯度进行预实验,确保读数在标准曲线范围内;
3)试剂盒中的dye reagent需要现配现用,配好的溶液无法储存,可能影响显色读数进而影响检测;如果样本需要分批检测,建议分批收样储存,待样本收齐后统一检测;
4)每次实验必须重新检测并绘制标准曲线。
absin生化检测试剂盒——离子检测系列:
货号
品名
用途
abs580105
铁离子检测试剂盒
铁离子(fe3+)含量检测
abs580140
铜离子检测试剂盒
铜离子(cu2+)含量检测
abs580188
硒离子检测试剂盒
硒离子含量检测
abs580103
钾离子检测试剂盒
钾离子(k+)含量检测
abs580104
钙离子检测试剂盒
钙离子(ca2+)含量检测
abs580106
镁离子检测试剂盒
镁离子(mg2+)含量检测
abs580107
磷离子检测试剂盒
磷离子含量检测
abs580108
锌离子检测试剂盒
锌离子(zn2+)含量检测
abs580110
孔雀绿磷离子检测试剂盒
孔雀绿磷离子含量检测
abs580146
铬离子检测试剂盒
铬(cr)离子含量检测
好消息!absin文献奖励重磅升级!
absin特色产品线:
wb相关:ecl发光液、预染marker、预制胶;ihc相关:二抗试剂盒、组化笔;ip/coip试剂盒;激动剂/抑制剂;血清、bsa、蛋白酶k、ctb、ttx、cee;凋亡试剂盒;呼吸爆发试剂盒;elisa试剂盒;重组蛋白;抗体: 二抗、标签抗体、对照抗体;定制服务(抗体/多肽/蛋白/标记/检测)...
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