DNA限制酶的功能和作用介绍

限制性核酸内切酶(以下简称限制酶):限制酶主要存在于微生物(细菌、霉菌等)中。一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列,并且能在特定的切点上切割dna分子。是特异性地切断dna链中磷酸二酯键的核酸酶(“分子手术刀”)。发现于原核生物体内,现已分离出100多种,几乎所有的原核生物都含有这种酶。是重组dna技术和基因诊断中重要的一类工具酶。例如,从大肠杆菌中发现的一种限制酶只能识别gaattc序列,并在g和a之间将这段序列切开。目前已经发现了200多种限制酶,它们的切点各不相同。苏云金芽孢杆菌中的抗虫基因,就能被某种限制酶切割下来。在基因工程中起作用。
dna连接酶:主要是连接dna片段之间的磷酸二酯键,起连接作用,在基因工程中起作用。基因工程中,大肠杆菌连接酶只连接黏性末端,而t4连接酶既可连接黏性末端,又可连接平末端。
dna聚合酶:主要是连接dna片段与单个脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键,在dna复制中起作用。
dna聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核酸片段的3′末端的羟基上,形成磷酸二酯键;而dna连接酶是在两个dna片段之间形成磷酸二酯键,不是在单个核苷酸与dna片段之间形成磷酸二酯键。
dna连接
dna聚合酶是以一条dna链为模板,将单个核苷酸通过磷酸二酯键形成一条与模板链互补的dna链;而dna连接酶是将dna双链上的两个缺口同时连接起来。因此dna连接酶不需要模板。rna聚合酶(又称rna复制酶、rna合成酶)的催化活性:rna聚合酶以完整的双链dna为模板,转录时dna的双链结构部分解开,转录后dna仍然保持双链的结构。真核生物rna聚合酶:真核生物的转录机制要复杂得多,有三种细胞核内的rna聚合酶:rna聚合酶i转录rrna,rna聚合酶ii转录mrna,rna聚合酶iii转录trna和其它小分子rna。在rna复制和转录中起作用。
反转录酶:rna指导的dna聚合酶,具有三种酶活性,即rna指导的dna聚合酶,rna酶,dna指导的dna聚合酶。在分子生物学技术中,作为重要的工具酶被广泛用于建立基因文库、获得目的基因等工作。在基因工程中起作用。
解旋酶:是一类解开氢键的酶,由水解atp来供给能量它们常常依赖于单链的存在,并能识别复制叉的单链结构。在细菌中类似的解旋酶很多,都具有atp酶的活性。大部分的移动方向是5'→3',但也有3'→5'移到的情况,如n'蛋白在φχ174以正链为模板合成复制形的过程中,就是按3'→5'移动。在dna复制中起做用。
dna限制酶作用于磷酸二酯键
dna连接酶作用于磷酸二酯键
dna聚合酶作用于磷酸二酯键
dna解旋酶作用于氢键

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