气相色谱联用仪为尿类固醇分析提供优势
气相色谱联用仪一直是类固醇谱临床评估的关键。评估了串联质谱法提供的测定性能改进。在所测试的糖皮质激素和雄激素分析物的范围内，三重四极杆系统的检测和定量限比单四极杆系统低约 20 倍，但更显着的改进是信噪比得到显着改善，线性范围更宽。这些好处允许更可靠和伴随测量具有显着不同丰度和更小体积尿液的类固醇。
肾上腺和性腺类固醇的尿代谢物分析已经常规进行了大约 30 年，定义了一种在全球范围内用于研究和临床诊断的方法，也被扩展到毒理学领域。在临床上，这种分析已广泛用于先天性代谢缺陷的诊断，*近还用于肾上腺肿瘤的鉴别诊断. *初，通过气相色谱 (gc) 和火焰离子化检测器 (fid) 等检测器测定类固醇的甲氧基胺-三甲基甲硅烷基衍生物的概况，但*近通过单四极杆质谱仪 (ms) 鉴定了类固醇。ms 的使用增强了 fid 的特异性，但挑战依然存在。类固醇及其代谢物的数量在分析物和疾病状态之间差异很大，这意味着校准范围可能会有很大差异。尤其是一些类固醇的含量较低（例如皮质醇），并且接近可接受的定量限 (loq)，即使在提取相对大量 (~20 ml) 的尿液之后也是如此。
使用串联质谱 (ms/ms) 可以改善信噪比，从而降低 loq。*近，液相色谱 (lc)-ms/ms 已成为定量分析的优选方法。由于通常不需要衍生化，因此可以获得更高的通量。尽管电离效率较差，但一些中性类固醇可以通过电喷雾 (esi) 和大气压化学 (apci) 电离成功量化，尽管它们的信号容易受到基质离子抑制的影响。尽管如此，更丰富的循环孕烯和雄烯类固醇，如皮质醇和睾酮，现在通常通过这种方式进行量化。然而，它们的代谢产物，其中一些保留了生物活性, 无法使用 lc-ms/ms 轻松检测或区分。a 环中酮烯醇功能的代谢形成 5α 和 5β 还原的二氢产物，随后 3-酮被 3α 和 β-羟基类固醇脱氢酶还原并产生离子化不佳的代谢物。此外，lc 对多组立体异构体的分离是有问题的。
因此，gc-ms/ms 对类固醇激素具有固有的优势，因为它们提供了一系列结构相似的亲脂性分析物。为 gc 分析形成的异构衍生物可以更容易地分辨，促进立体化学区分。此外，与前体激素相比，来自代谢物衍生物的信号强度没有受到影响。我们通过单四极杆分析调整了基于 gc 的尿类固醇分析方法，以利用串联质谱的能力，并在此报告经过验证的测定。
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