百萤——Annexin V-iFluor 594标记实验方案
annexin v-ifluor 594标记是美国aat bioquest研发的用于检测细胞功能的探针，膜联蛋白是钙依赖性磷脂结合蛋白家族。百萤生物是aat bioquest的中国代理商，为您提供优质的annexin v-ifluor 594检测试剂。
实验方案
分析方案
概述
用测试化合物（200μl/样品）制备细胞
添加annexin v结合物测定溶液
室温孵育30-60分钟
用流式细胞仪或荧光显微镜分析
1.用膜联蛋白v缀合物制备和孵育细胞：
1.1制备膜联蛋白v结合测定缓冲液：10mm hepes，140mm nacl和2.5mm cacl2，ph 7.4。
1.2用测试化合物处理细胞一段所需的时间（用星形孢菌素处理的jurkat细胞4-6小时）以诱导细胞凋亡。
1.3离心细胞，得到1-5×105个细胞/管。
1.4将细胞重悬于200μl膜联蛋白v结合测定缓冲液中（来自步骤1.1）。
1.5在细胞中加入2μl膜联蛋白v结合物。
可选：在细胞内加入死细胞染色剂如碘化丙锭，用于坏死细胞。
1.6在室温下孵育30至60分钟，避光。
1.7在用流式细胞仪或荧光显微镜分析细胞之前，加入300μl膜联蛋白v结合测定缓冲液（来自步骤1.1）以增加体积（参见下面的步骤1.8）。
1.8使用流式细胞仪或荧光显微镜监测荧光强度（参见下面的步骤2或3）。
2.使用流式细胞仪分析：
通过使用具有适当过滤器的流式细胞仪来量化膜联蛋白v缀合物。
注意：粘附细胞上的膜联蛋白v结合流式细胞术分析未经常检测，因为在细胞分离或收获期间可能发生特定的膜损伤。 然而，casiola-rosen等人先前报道了利用膜联蛋白v对贴壁细胞类型进行流式细胞术的方法。 和van engelend等。
3.使用荧光显微镜分析：
3.1移取步骤1.6的细胞悬液，用膜联蛋白v结合测定缓冲液（来自步骤1.1）冲洗1-2次，然后用膜联蛋白v结合测定缓冲液（来自步骤1.1）重悬细胞。 将细胞添加到盖有玻璃盖玻片的载玻片上。
注意：对于粘附细胞，建议直接在盖玻片上生长细胞。 与膜联蛋白v缀合物孵育（步骤1.6）后，用膜联蛋白v结合测定缓冲液（来自步骤1.1）冲洗1-2次，并将膜联蛋白v结合测定缓冲液（来自步骤1.1）加回到盖玻片中。 在玻璃载玻片上翻转盖玻片并观察细胞。 在与膜联蛋白v缀合物孵育后，细胞也可以在2％甲醛中固定，并在显微镜下观察。
3.2在荧光显微镜下用适当的滤光片分析膜联蛋白v缀合物的凋亡细胞
数据分析
下图是使用流式细胞仪检测膜联蛋白v-mfluor violet 450与磷脂酰*氨酸在jurkat细胞凋亡中的结合活性的实例。 在活的非凋亡细胞中，膜联蛋白v-mfluor violet 450检测非诱导细胞中的先天性细胞凋亡，其通常为所有细胞的2-6％。 在凋亡细胞中，膜联蛋白v-mfluor violet 450与磷脂酰*氨酸结合，磷脂酰*氨酸位于细胞膜的外部小叶上，导致染色强度增加。
图1.在jurkat细胞中检测膜联蛋白vmfluor violet 450和磷脂酰*氨酸的结合活性。 将jurkat细胞在37℃，5％co2培养箱中不用（蓝色）或用1μm星形孢菌素（红色）处理5小时，然后用annexin v-mfluor violet 450染色30分钟。 使用facscalibur（becton dickinson，san jose，ca）流式细胞仪，使用紫外激光在ex / em = 405 / 450nm下测量膜联蛋白v-mfluor violet 450的荧光强度。
光谱：
光谱性质
吸光度; 587
校正因子：0.05
校正因子：0.04
消光系数：1800001
激发(nm)：588
发射(nm)：604
量子产率：0.531
关键词：显微镜 培养箱 流式细胞仪 荧光显微镜
信百诺甲醛释放量检测气候舱简单介绍
强调，塑造中国制造的新优势，必须释放改革红利
“绿电”满格 双方奔赴！肇庆市政府与宁德时代签署全面合作协议
乐鸟消防物联网能够实现火警上报和处理？
上海雷磁电导率仪的简单介绍
百萤——Annexin V-iFluor 594标记实验方案
2014年测量仪排行氙灯老化试验箱的结构制造分析
氨氮检测仪 氨氮测定仪 哪家好
南通地磅（崇川地磅（港闸地磅（旧馆地磅）千金地磅）石淙地磅维修
可程式恒温恒湿试验箱选购指南
MBR膜一体化污水处理设备组成装置的作用
阻火包使用方法
恒温恒湿培养箱温湿度的重要性
西安银行金库门
硬质聚氨酯直埋管具有的特点
锅炉软化水树脂的储存与注意问题
KP4X三级排气防水锤型空气阀产品特点及应用领域
赛多利斯全新大触摸屏新鲜出炉啦
VP170方向控制阀|美国parker派克技术参数及应用
电子数显高精度温湿度计厂家
实验方案
分析方案
概述
用测试化合物（200μl/样品）制备细胞
添加annexin v结合物测定溶液
室温孵育30-60分钟
用流式细胞仪或荧光显微镜分析
1.用膜联蛋白v缀合物制备和孵育细胞：
1.1制备膜联蛋白v结合测定缓冲液：10mm hepes，140mm nacl和2.5mm cacl2，ph 7.4。
1.2用测试化合物处理细胞一段所需的时间（用星形孢菌素处理的jurkat细胞4-6小时）以诱导细胞凋亡。
1.3离心细胞，得到1-5×105个细胞/管。
1.4将细胞重悬于200μl膜联蛋白v结合测定缓冲液中（来自步骤1.1）。
1.5在细胞中加入2μl膜联蛋白v结合物。
可选：在细胞内加入死细胞染色剂如碘化丙锭，用于坏死细胞。
1.6在室温下孵育30至60分钟，避光。
1.7在用流式细胞仪或荧光显微镜分析细胞之前，加入300μl膜联蛋白v结合测定缓冲液（来自步骤1.1）以增加体积（参见下面的步骤1.8）。
1.8使用流式细胞仪或荧光显微镜监测荧光强度（参见下面的步骤2或3）。
2.使用流式细胞仪分析：
通过使用具有适当过滤器的流式细胞仪来量化膜联蛋白v缀合物。
注意：粘附细胞上的膜联蛋白v结合流式细胞术分析未经常检测，因为在细胞分离或收获期间可能发生特定的膜损伤。 然而，casiola-rosen等人先前报道了利用膜联蛋白v对贴壁细胞类型进行流式细胞术的方法。 和van engelend等。
3.使用荧光显微镜分析：
3.1移取步骤1.6的细胞悬液，用膜联蛋白v结合测定缓冲液（来自步骤1.1）冲洗1-2次，然后用膜联蛋白v结合测定缓冲液（来自步骤1.1）重悬细胞。 将细胞添加到盖有玻璃盖玻片的载玻片上。
注意：对于粘附细胞，建议直接在盖玻片上生长细胞。 与膜联蛋白v缀合物孵育（步骤1.6）后，用膜联蛋白v结合测定缓冲液（来自步骤1.1）冲洗1-2次，并将膜联蛋白v结合测定缓冲液（来自步骤1.1）加回到盖玻片中。 在玻璃载玻片上翻转盖玻片并观察细胞。 在与膜联蛋白v缀合物孵育后，细胞也可以在2％甲醛中固定，并在显微镜下观察。
3.2在荧光显微镜下用适当的滤光片分析膜联蛋白v缀合物的凋亡细胞
数据分析
下图是使用流式细胞仪检测膜联蛋白v-mfluor violet 450与磷脂酰*氨酸在jurkat细胞凋亡中的结合活性的实例。 在活的非凋亡细胞中，膜联蛋白v-mfluor violet 450检测非诱导细胞中的先天性细胞凋亡，其通常为所有细胞的2-6％。 在凋亡细胞中，膜联蛋白v-mfluor violet 450与磷脂酰*氨酸结合，磷脂酰*氨酸位于细胞膜的外部小叶上，导致染色强度增加。
图1.在jurkat细胞中检测膜联蛋白vmfluor violet 450和磷脂酰*氨酸的结合活性。 将jurkat细胞在37℃，5％co2培养箱中不用（蓝色）或用1μm星形孢菌素（红色）处理5小时，然后用annexin v-mfluor violet 450染色30分钟。 使用facscalibur（becton dickinson，san jose，ca）流式细胞仪，使用紫外激光在ex / em = 405 / 450nm下测量膜联蛋白v-mfluor violet 450的荧光强度。
光谱：
光谱性质
吸光度; 587
校正因子：0.05
校正因子：0.04
消光系数：1800001
激发(nm)：588
发射(nm)：604
量子产率：0.531
关键词：显微镜 培养箱 流式细胞仪 荧光显微镜
信百诺甲醛释放量检测气候舱简单介绍
强调，塑造中国制造的新优势，必须释放改革红利
“绿电”满格 双方奔赴！肇庆市政府与宁德时代签署全面合作协议
乐鸟消防物联网能够实现火警上报和处理？
上海雷磁电导率仪的简单介绍
百萤——Annexin V-iFluor 594标记实验方案
2014年测量仪排行氙灯老化试验箱的结构制造分析
氨氮检测仪 氨氮测定仪 哪家好
南通地磅（崇川地磅（港闸地磅（旧馆地磅）千金地磅）石淙地磅维修
可程式恒温恒湿试验箱选购指南
MBR膜一体化污水处理设备组成装置的作用
阻火包使用方法
恒温恒湿培养箱温湿度的重要性
西安银行金库门
硬质聚氨酯直埋管具有的特点
锅炉软化水树脂的储存与注意问题
KP4X三级排气防水锤型空气阀产品特点及应用领域
赛多利斯全新大触摸屏新鲜出炉啦
VP170方向控制阀|美国parker派克技术参数及应用
电子数显高精度温湿度计厂家