氨基酸作为组成蛋白质的基本单元,在生物代谢过程中起着关键作用。动物肝脏、肾脏是氨基酸代谢的主要器官,尿液中氨基酸的变化可以反映体内氨基酸的代谢情况,以及肝脏、肾脏的生理状态;植物体内氨基酸含量对研究植物在不同时期氮代谢的变化、植物根系生理、植物对氮素的吸收、运输、同化及营养状况等具有重要意义。氨基酸(aa)含量检测试剂盒的测定原理:氨基酸的a-氨基可与水合茚三酮反应,产生蓝紫色化合物,其颜色的深浅与氨基酸的含量成正比。氨基酸(aa)含量检测试剂盒的计算氨基酸含量方法:
(1)按蛋白浓度计算氨基酸含量(μmol /mg 蛋白)=[c 标准品×v 标准品×(a 测定-a 空白)÷(a 标准-a 空白)] ÷(cpr×v 样)=10×(a 测定-a 空白)÷(a 标准-a 空白) ÷cpr
(2)按样本鲜重计算氨基酸含量(μmol /g 鲜重)=[c 标准品×v 标准品×(a 测定-a 空白)÷(a 标准-a 空白)]×(v 样总 ÷v 样)÷w=10×(a 测定-a 空白)÷(a 标准-a 空白) ÷w c
标准品:标准品浓度,10 μmol/ml;v 标准品:反应体系中加入标准品体积,0.01 ml;w:样品质量,g;v 样:反应体系中加入样品提取液体积,0.01 ml;v 样总:样品提取液总体积,1ml; cpr:上清液蛋白质浓度,mg/ml。
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